1,8-cineole promueve el arresto del ciclo celular y senescencia inducida por estrés oxidativo en células HepG2 y las sensibiliza a la acción de fármacos antisenescencia

RODENAK KLADNIEW B; CRESPO R; CASTRO A; GALLE M; GARCÍA DE BRAVO M

La Plata

Jornada; Jornadas de Investigación 2019; 2019

Facultas de Ciencias Médicas UNLP

Introducción: 1,8-cineole es un monoterpeno derivado de plantas y hierbas aromáticas y componente principal del aceite esencial de eucalipto. Diferentes trabajos han reportado propiedades farmacológicas del 1,8-cineole tales como antioxidante, hipolipemiante, bactericida fungicida entre otras, y en mucha menor medida, su actividad antitumoral. En trabajos previos demostramos que 1,8-cineole inhibe la proliferación de células HepG2 (hepatocarcinoma celular humano, HCC), sin embargo, los mecanismos de acción antitumorales no han sido del todo dilucidados. Objetivos: evaluar los mecanismos de acción involucrados en la actividad antiproliferativa del 1,8-cineole así como los potenciales beneficios de su combinación con compuestos antitumorales que presentan propiedades ?antisenescencia? en células HepG2. Materiales y métodos: la viabilidad celular se evaluó mediante el ensayo de MTT. El ciclo celular fue analizado por citometría de flujo y western blot. La senescencia celular fue determinada a través el ensayo de actividad de β-galactosidasa (SA-β-gal-assay). La apoptosis fue evaluada mediante ensayo de actividad de caspasa-3, western blot y ensayo de TUNEL. La expresión de quinasas MAP (ERK, JNK and p38), AMPK, y Akt/mTOR fueron analizadas por western blot. Las especies reactivas del oxígeno (EROs) y potencial de membrana mitocondrial (PMM) fueron evaluados por microscopía de fluorescencia y citometría de flujo. Resultados: 1,8-cineole inhibió la proliferación celular promoviendo el arresto celular en fase G0/G1. Mientras que 1,8-cineole fue incapaz de inducir apoptosis en células HepG2, este monoterpeno produjo senescencia celular. 1,8-cineole indujo la producción de EROs, la depolarización del PMM, la activación de las quinasas AMPK, ERK y p38, y la inhibición de mTOR. Antioxidantes como N-acetil-L-cisteína y vitaminas C y E previnieron la inhibición de la proliferación y la senescencia en células HepG2 tratadas con 1,8-cineole, lo que sugiere una relación directa entre la generación de EROs y el efecto antiproliferativo de este monoterpeno. Células pretratadas con concentraciones no inhibitorias de 1,8-cineole resultaron más sensibles a la acción antiproliferativa de compuestos con propiedades anti-senescentes tales como quercetina, simvastatina, e inhibidores de ERK y p38. Además, los tratamientos combinados entre 1,8-cineole y cada compuesto inhibieron de manera sinérgica el crecimiento celular. Finalmente, se evidenció que la combinación entre 1,8-cineole y simvastatina indujo apoptosis en las células hepáticas tumorales. Conclusiones: 1,8-cineole inhibe la proliferación de células de HCC promoviendo el arresto del ciclo celular en fase G0/G1 y senescencia celular mediante la inducción de estrés oxidativo y la activación de las vías de señalización moduladas por AMPK y MAP quinasas. Además, este monoterpeno sensibiliza a las células HepG2 a la acción de compuestos anti-senescentes, lo que sugiere que 1,8-cineole tiene potencial como agente antineoplásico y neoadyuvante en combinación fármacos anti-senescentes en la terapia contra el HCC.