Nanopartículas de oro con 6-mercaptopurina para "drug delivery": ensayos de citotoxicidad con células A549

M. A. C. HUERGO; C. OTERO; C. VERICAT; R. CRESPO

La Plata

Encuentro; XVIII Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados (Nano Y-TEC); 2018

NANOPARTÍCULAS DE ORO CON6-MERCAPTOPURINA PARA ?DRUG DELIVERY?: ENSAYOS DE CITOTOXICIDADCON CÉLULAS A549Otero, C.1;Huergo, M. A.1,*;Vericat, C.1; Crespo, R.21. INIFTA,Universidad donde realiza susinvestigaciones el autor I, dirección.2. INIBIOLP,Universidad donde realiza susinvestigaciones el autor II, dirección.*e-mail: mahuergo@inifta.unlp.edu.arLas nanopartículasde oro (AuNPs)se están empleando cada vez más en aplicaciones biomédicas, tanto paradiagnóstico como para ciertas terapias, entre ellas para transporte yliberación controlada de fármacos y fototermiaplasmónica[1]. Esto se debe en gran medida a sus propiedades ópticas singulares y alhecho de que son biocompatiblesy estables en medios biológicos [2]. Además es posible sintetizar ?a medida? AuNPsde tamaños y formas muy diferentes y funcionalizarlasfácilmente mediante la química del tiol,lo que les confiere una gran versatilidad para las aplicaciones [3]. Eldesarrollo de nanomateriales?inteligentes? se basa muchas veces en utilizar las propias características de los sistemas biológicos para dirigir tratamientos. Por ejemplo, es sabido que laconcentración intracelular de glutatión (GSH), un antioxidante vital, essignificativamente mayor que la extracelular, y que esta diferencia seencuentra particularmente incrementada en ciertos tumores. La estrategiaconsiste en este caso en llevar AuNPs funcionalizadas con especies unidas a través de un grupotiol yfavorecer la liberación controlada de esta especie por su intercambio con GSH,que se verá mucho más favorecido en el interior de las células tumorales.Estaestrategia de intercambio de ligandosse ha empleado en ensayos químicos, habiéndose logrado así la liberación devarios tiolesde interés biológico [4] y aquí se propone para el caso de la 6-mercaptopurina(6MP), un tiolsintético empleado para el tratamiento de leucemias y enfermedades autoinmunes.En este trabajo se modificaron con 6MP dos tipos de nanopartículas:(i) AuNPsesféricas de 15 nmde diámetro recubiertas con citrato y (ii) AuNPstriangulares (AuNTs)de aproximadamente 70 nmde lado y altura < 10 nm[5], lográndose dispersiones acuosas purificadas estables a pH = 7. En el casode las AuNPsesféricas las dispersiones se pusieron en contacto con soluciones de GSH,pudiéndose observar mediante espectroscopíaUV-vis el intercambio de ligandosluego de 48 hs.Paraevaluar el potencial efecto citotóxico de ambos tipos de AuNPscargadas con 6MP se empleó la línea tumoral humana A549. Las células en cultivose pusieron en contacto con diferentes concentraciones de 6MP, con ambos tiposde AuNPs-6MP y con AuNPssin 6MP y se evaluó la viabilidad celular empleando el ensayo de reducción de tetrazolio(MTT). Las AuNPs sin6MP no resultaron ser citotóxicas para concentraciones < 200 µM. Paratratamientos de 24 hs las AuNPs-6MPde 15 nmgeneraron mayor citotoxidadque la 6MP libre en concentraciones equivalentes, mientras que paratratamientos de 48 hsno hubo diferencias significativas entre célulastratadas con el fármaco libre o unido a las AuNPs. LosAuNTs-6MP también generaron un aumento en la inhibición de la viabilidadcelular respecto a los AuNTslibres, aunque el porcentaje de inhibición fue menor.Referencias[1] Pelaz, B et al. (2017). ACS Nano. 11, 2313?2381. [2] Jain, P et al. (2008). Acc. Chem. Res. 41, 1578?1586. [3]Pensa E et al. (2012). Acc. Chem. Res. 45, 1183?1192. [4] Kim C et al. (2009). Nanoscale 1, 61-67.[5]Huergo,MA et al., enviado.