INIBIOLP   05426
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE LA PLATA "PROF. DR. RODOLFO R. BRENNER"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
: RESULTADOS PRELIMINARES DEL PRECONDICIONAMIENTO ISQUÉMICO UTERINO COMO ESTRATEGIA PARA MEJORAR LA CALIDAD DE INJERTOS UTERINOS
Autor/es:
TARZIA MERCEDES; STRINGA PABLO; RAIMONDI CLEMENTE; VECCHIO LEANDRO; ARNAL, NATHALIE; MANGONE GASTÓN; LAUSADA NATALIA; MACHUCA MARIANA
Reunión:
Jornada; Jornadas de Investigación; 2018
Institución organizadora:
Fac Cs Médicas (UNLP)
Resumen:
Introducción: el trasplante de útero surge como una alternativa terapéutica ante casos de infertilidad absoluta como consecuencia de alteraciones uterinas congénitas o adquiridas. Actualmente, los resultados favorables (nacimiento exitoso post-trasplante) se han llevado a cabo de úteros provenientes de donantes vivos, particularmente la mamá de la receptora, lo cual representa una cirugía de alto riesgo para la donante. Esta realidad motiva a buscar estrategias para acondicionar úteros provenientes de donantes con criterios neurológicos de muerte cuya condición de tejido cadavérico exacerba la injuria por isquemia-reperfusión (IIR). El precondicionamiento isquémico (PCI) es una estrategia con resultados favorables demostrados en otros órganos procurados y no ha sido hasta la actualidad evaluado en etapas experimentales para los injertos uterinos y su capacidad de atenuar el daño IIR. Objetivos: evaluar los resultados histológicos de IIR del tejido uterino in vivo, en un modelo experimental de isquemia reperfusión uterina en ratas. Analizar el PCI como estrategia atenuante de las mismas.Materiales y métodos: se utilizaron 15 ratas Wistar hembras, adultas, sincronizadas en fase de diestro del ciclo estral determinado por frotis vaginal y Tinción 15. Se plantearon 4 grupos. BASAL (N=3) inmediatamente al abordaje se toman muestras de cuerno uterino; IIR (N=4) luego de 30 minutos de isquemia uterina y 60 minutos de reperfusión se toman muestras de cuerno uterino; PCI (N=4) se aplica el ciclo de PCI que consiste en 10 min. de isquemia uterina + 10 min. de reperfusión uterina previo al tiempo de isquemia mayor 30 minutos de isquemia uterina y 60 minutos de reperfusión y toma de muestras de cuerno uterino; SHAM (N=3) luego de 110 minutos de anestesia se toman muestras de cuerno de útero, para considerar el máximo tiempo de experimento sumando PCI + tiempo de isquemia tibia + reperfusión sin realizar las maniobras quirúrgicas planteadas a excepción del abordaje sin procedimiento de isquemia-reperfusión. Las ratas fueron anestesiadas con Isoflurano (5 % durante la inducción, 1.5-2% para mantenimiento) y Tramadol20 mg/Kg SC. Mediante técnicas microquirúrgicas, se realizó el reconocimiento y disección de la arteria aorta abdominal distal a su bifurcación. Posteriormente, se clampeó la arteria aorta abdominal por encima de su bifurcación y por debajo del ovario derecho para impedir la circulación colateral y dar inicio a la fase de isquemia uterina prolongada por el transcurso de 30 min. (grupo IIR) momento en el que los clamps son retirados para dar paso a la reperfusión del útero por el período de una hora, donde se dará lugar a la toma de muestras. (N=4). En el grupo con PCI (N=4), previamente a la inducción de la isquemia prolongada, se realizó un clampeo de 10 minutos de isquemia seguido de 10 minutos de reperfusión para luego exponer al cuerno uterino a los 30 min. de isquemia y 60 min. de reperfusión, momento del muestreo de útero para el análisis morfológico. Se realizó la eutanasia de los animales mediante embolia gaseosa bajo inconsciencia. La valoración de los resultados se llevó a cabo mediante la observación del estroma, el epitelio de superficie y el epitelio glandular. En ambos epitelios se evaluaron leucocitosis, degeneración y picnosis; en estroma se evaluó edema, congestión e infiltración. Todos estos parámetros fueron evaluados individualmente y clasificados con un puntaje de 0-3 de acuerdo al Score de Yunus Oktay que establece puntajes en base a la extensión de los cambios histopatológicos: 0: Sin hallazgos patológicos; 1: Hallazgos patológicos en menos del 33% de la superficie de la sección uterina; 2: Hallazgos patológicos en 33% a 66% de la superficie de la sección uterina; 3: Hallazgos patológicos en más del 66% de la superficie de la sección uterina Para establecer el índice total se suma cada hallazgo dando un valor de 0 a 27.Resultados: en los grupos SHAM y CONTROL no se evidenciaron alteraciones morfológicas. En el grupo IIR se observaron cambios a nivel estromal con edema e infiltrado leucocitario extensos. Asimismo se observó moderada leucocitosis asociada a picnosis (hallazgo irreversible) en epitelios glandular y de superficie (13.5±1.9). En el grupo con PCI se observó escaso infiltrado leucocitario epitelial y estromal en menos del 33% de la superficie. Se evidenció degeneración glandular reversible y escaso edema a nivel estromal (3.3±1.3). En las dos ratas sin eutanasia posterior, el procedimiento no fue letal. En las seis restantes no se observaron complicaciones quirúrgicas. A los 60 min. post-reperfusión el cuerno uterino derecho presentó la misma coloración que el contralateral.Conclusiones: en una experiencia en curso podemos concluir que el precondicionamiento isquémico utilizando los mismos ciclos que en otros órganos sólidos confiere una marcada tendencia a la protección que debemos evaluar sumando tres animales más a los grupos relevantes IIR y PCI. Es nuestra intención, además completar los resultados de la supervivencia prolongada con observación de preñez exitosa a término.