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Introducción:La Apolipoproteína A-I (apoA-I) es la proteína mayoritaria de las lipoproteínas de alta densidad (HDL, por sus siglas en ingles), con propiedades antiaterogenicas atribuidas a su rol en el transporte reverso del exceso de colesterol desde tejidos periféricos hacia el hígado para su catabolismo y excreción. ApoA-I está compuesta de varias hélices anfipáticas. En solución, ellas forman un ramillete con estructuras terciaria y cuaternaria pobremente caracterizadas. Dependiendo de su concentración, esta sufre auto-agregación para formar dímeros y oligómeros de orden superior. A su vez, dichas hélices interaccionan con fosfolípidos para formar lipoproteínas de alta densidad (HDL) discoidales (dHDL).Objetivos:El objetivo del presente estudio es obtener información sobre las propiedades de auto-agregación en solución de apoA-I para estudiar el mecanismo que conducea la generación de HDL.Materiales y métodos:Seis mutantes de cisteína (K107C, K133C y K226C, F104C, L137C y F225C), fueron específicamente diseñadas y marcadas con la sonda fluorescente pirenil-maleimida, en posiciones correspondientes a sus caras hidrofílicas e hidrofóbicas de las hélices 4, 5 y 6 respectivamente. La fluorescencia del monómero y del excímero de pireno, de las distintas variantes de apoA-I marcadas, fueron registrados en función de la concentración total de proteína y analizadas con varios modelos matemáticos para evaluar las constantes de disociación (Kd) correspondientes a los diferentes eventos de oligomerización.Resultados:Los mutantes marcados fueron estables en solución según lo indicado por la fluorescencia de triptofano. Con la excepción de F104C, las demás mutantes fueron biológicamente activos ya que son capaces de interactuar con fosfolípidos para formar dHDL. Los espectros de emisión de fluorescencia del pireno mostraron formación de excímero solo en el caso de las mutantes F225C, K133C y K226C, lo que indica la participación de las hélices 5 y 10 en las regiones de contacto durante el proceso de oligomerización. Los cambios en el P-Value de la emisión del monómero también dieron información sobre cambios conformacionales durante el proceso de oligomerización de otras variantes de apoA-I.Conclusiones:Se logró evidenciar distintas posiciones de contacto entre hélices de apoA-I durante el proceso de oligomerización, correspondiente a las hélices 5 y 10.