Characterization of lipovitellin from the eggs of araneae Polybetes pythagoricus

LAINO A,; HERAS H.; CUNNINGHAM ML.,; GARCIA CF.

San Miguel de Tucumán, Tucumán, Argentina

Congreso; XLV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones en Bioquímica y Biología Molecular; 2009

Las lipoproteínas presentes en huevos de especies ovígeras se denominan lipovitelinas, las cuales poseen gran importancia por mantener la viabilidad de la progenie. En arácnidos solo fueron descriptas hasta el presente, 2 lipovitelinas de ácaro. El objetivo de este trabajo fue aislar, purificar  y caracterizar lipovitelinas de la araña P. pythagoricus. Las lipoproteínas fueron aisladas del citosol de huevos mediante ultracentrifugación en gradiente de densidad. Lípidos y  ácidos grasos se analizaron por cromatografía, y las apoproteínas fueron caracterizadas mediante electroforesis. Del citosol de huevos se aislaron dos lipovitelinas de alta y muy alta densidad denominadas LV-1 y LV-2. El porcentaje de lípidos en la LV-1 fue de 36% y en la LV-2 de 15,6%. Los fosfolípidos fueron los lípidos mayoritarios en ambas fracciones (90,7% y 45,5%, respectivamente). Los ácidos grasos, en orden de predominancia, fueron ácidos oleico, linoleico y palmítico en la LV-1, y palmitico, oleico y linoleico en la LV-2. Al analizar la LV-1 por electroforesis en condiciones nativas se observo en LV-1 una proteína  principal de 680 kDa, y en condiciones desnaturalizantes 2 bandas de 74 y 25 kDa. El total de hexosas en esta LV fue de 1.48% (p/p). La LV-2 presentó bajo condiciones nativas tres proteínas de  571, 400 y 270 kDa las cuales poseen el mismo patrón de apoproteínas constituyentes, con la presencia en diferentes proporciones de una proteína mayoritaria de 181 y otras minoritarias de 93 y 60 KDa. El total de hexosas en LV2 fue de 0.69 % (p/p). La presencia de hemocianina en ambas LVs, fue descartada ya que no se observó la absorbancia característica de las oxihemocianinas. Por otro lado estas lipovitelinas no presentan identidad inmunológica con las lipoproteínas hemolinfáticas no vitelogénicas de adultos.