Estudio del metabolismo lipídico en el caracol Pomacea canaliculata bajo condiciones de estrés por ayuno y exposición a un tóxico

LAVARÍAS SABRINA; RODRIGUEZ CAPÍTULO ALBERTO; PETERSON G; VES LOSADA, ANA; LAGRUTTA, LUCÍA C.

San Luis

Jornada; VII Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2017

IMIBIO-SL (CONICT-UNSL)

Los lípidos tienen una función preponderante en el metabolismo energético de los organismos y pueden resultar afectados bajo condiciones de estrés por ayuno / alimentación, como así también por exposición a tóxicos. En este sentido las actividades de origen antrópico, como por ejemplo la utilización de agroquímicos para controlar plagas, pueden afectar la homeostasis lipídica en los organismos acuáticos. En nuestro país, la cipermetrina (CYP) es un plaguicida ampliamente utilizado que produce efectos adversos sobre la fauna no-objetivo alterando diversas rutas metabólicas. El objetivo de este estudio fue determinar si la exposición a CYP y el ayuno alteran la homeostasis lipídica. Para ello, se escogió el caracol de agua dulce Pomacea canaliculata como modelo de bioensayo. Esta especie se caracteriza por ser nativa de la cuenca del Plata, cosmopolita y capaz de tolerar diversas condiciones ambientales, por lo tanto se propone a este organismo como bioindicador para estudios de monitoreo de aquellos ambientes sometidos a diversos factores de estrés. Se expusieron caracoles adultos machos durante 4 y 10 días a concentraciones subletales de CYP (12, 30, 75 y 100 µg/l) bajo condiciones controladas de laboratorio y sin alimentación. Se preparó una solución de CYP (Glextrin 25, GLEBA S.A. La Plata, Argentina) disuelta en etanol de manera tal de mantener una concentración del solvente menor a 0,001 % en el medio de exposición y en los controles respectivos. Al ensayo se agregaron otros caracoles que no fueron expuestos ni al tóxico ni al etanol para evaluar el efecto del ayuno. Estos tratamientos fueron considerados como control del solvente de la exposición con el pesticida. Luego de la exposición, los caracoles se anestesiaron en hielo y se disecaron las glándulas digestivas (GD). Una pequeña muestra de la GD fue procesada para analizar la topología y distribución celular de los lípidos neutros (LN) por microscopía de fluorescencia. Para ello se marcaron los LN con BODIPY493/503 y los núcleos con DAPI. El resto de las GD se homogenizaron en buffer sacarosa 0,25 M. Se extrajeron los lípidos de los homogenatos con la mezcla cloroformo/metanol 2:1, luego se cuantificaron por gravimetría. Se realizó el análisis de los lípidos por cromatografía en capa fina.El estudio histológico reveló la presencia de gotas de lípidos (LD) localizadas principalmente en el citosol. Así mismo los núcleos presentaron una pequeña cantidad de LD. Los lípidos totales resultaron significativamente aumentados (p< 0,05) en los caracoles expuestos con CYP en relación a los controles. El ayuno provocó el descenso del contenido lipídico en la GD respecto de los animales que recibieron alimento. La concentración de etanol utilizada como vehículo de la CYP no resultó un agente estresante adicional respecto del ayuno. Así mismo se observó que los TAG, COL y EC aumentaron en los tratamientos con CYP, lo que podría estar confirmando los cambios observados en las poblaciones de LD citosólicas. Los resultados de este estudio indicarían que metabolismo lipídico en la GD de P. canaliculata fue alterado por el CYP a nivel molecular y celular. Por lo tanto sería interesante realizar bioensayos con otros tóxicos y estudiar organismos invertebrados para estudiar la relación entre la situación de estrés con la alteración del metabolismo lipídico. Cabe destacar que se describe por primera vez la presencia de LD nucleares en moluscos y quedaría por determinar su función específica.