Cellular fate of phospholipids (PL) synthesized during G2/M.

VES LOSADA ANA; MOSCOSO VERÓNICA; SCAGLIA NATALIA; RODRIGUEZ SAWICKI LUCIANA; CÓRSICO BETINA

Cordoba

Congreso; LII Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Bioquimica y Biologia Molecular; 2016

Sociedad Argentina de Investigacion Bioquimica y Biologia Molecular

El ciclo celular es uno de los procesos más importantes de la biología; es básicamente ?elmedio fundamental por el que todos los organismos vivos se propagan?. El ciclo de divisióncelular comprende la duplicación de las estructuras celulares y la posterior división en doscélulas hijas. Así, la regulación del mismo determina el crecimiento y desarrollo de losembriones, el recambio celular en tejidos adultos, la magnitud de respuestas inmunes y laproliferación de organismos unicelulares. No es sorprendente que la desregulación del ciclocelular esté relacionada a numerosas patologías, como el cáncer.En las células tumorales se observa una reprogramación de su metabolismo hacia lasíntesis de las macromoléculas, necesarias para la duplicación celular. Entre las víasmetabólicas exacerbadas en células tumorales se encuentra la síntesis de ácidos grasos,componentes esenciales para la producción de fosfolípidos de membranas. La activa síntesisde lípidos es necesaria para mantener la proliferación celular, especialmente en célulastumorales. Sin embargo, se conoce poco acerca de la coordinación del metabolismo demembranas y el ciclo celular, especialmente durante las últimas fases del ciclo(mitosis/citoquinesis).El destino subcelular de los lípidos sintetizados durante mitosis/citoquinesis fue estudiadoutilizando células sincronizadas a las cuales se les administró un pulso de 14C-acetato a las 8hs de la liberación del bloqueo con timidina, correspondiente al inicio de la fase G2/M.Utilizando un gradiente de sacarosa se estudió la distribución de la marca incorporada en loslípidos. Como resultado pudimos observar la presencia de marca en las fracciones quecontienen núcleo y retículo endoplásmico. Estos estudios están siendo complementados con lalocalización de proteínas relacionadas al metabolismo de ácidos grasos y fosfolípidos(CTP:fosfocolina citidililtransferasa α -CTα-, lisofosfatidilcolina acil-transferasa 3 ?LPCAT3-,ácido graso sintasa ?FASN- y proteína de unión a ácidos grasos 5 -FABP5-) porinmunofluorescencia. El análogo metabolizable de la colina, propargilcolina, será utilizado parala localización de fosfatidilcolina sintetizada durante G2/M mediante inmunofluorescencia.Asimismo se setearon las condiciones para el knockdown de estas enzimas por RNA deinterferencia con el fin de analizar su participación en este proceso.El objetivo final del presente trabajo es avanzar en el estudio de la función y regulación delmetabolismo lipídico, específicamente la síntesis y remodelación de fosfolípidos de membranadurante la división celular. Estos estudios contribuirán al conocimiento de los requerimientosmetabólicos durante el ciclo celular y podrían tener profundas implicancias para el tratamiento ydiagnóstico de enfermedades hiperproliferativas, como el cáncer.