Influencia de la distribución lateral de dominios lipídicos, sobre la remoción de Colesterol mediada por apo-AI. Mecanismos de compensación celular.

JAUREGUIBERRY MS, FINARELLI GS, SANCHEZ S,GONZALEZ MC, TRICERRI MA, RIMOLDI OJ.

Rosario, Santa Fe.

Jornada; Jornadas de Lípidos; 2008

La interacción de la apolipoproteína A-I (apoA-I) con las células depende de la composición de la membrana, de la separación lateral de dominios y de la composición de los complejos lipoproteicos. El mecanismo activo de remoción de fosfolípidos y colesterol (Col) por parte de esta apolipoproteína, es mediado por transportadores ABC, como el  ABCA1. La sobreexpresión de SCD-1 en células CHO induce un enriquecimiento de la membrana en ácidos grasos (AGs) monoinsaturados a expensas de los saturados y sin alteración de los poliinsaturados. Comprobamos que la redistribución de los dominios lipídicos altera la remoción de Col, sin alterar la expresión de ABCA1. Además, en diversos trabajos se ha asociado el exceso de Col libre en macrófagos, con citotoxicidad. En base a estos antecedentes, postulamos que “La actividad de las desaturasas de AGs provoca cambios en la composición la membrana.  Esto a su vez modifica la distribución de dominios lipídicos y la remoción de Col, sin alterar la expresión de receptores como el ABCA1”. Aquí analizamos la influencia del cambio de composición de la membrana inducido por la sobreexpresión de la desaturasa, sobre la distribución lateral de dominios lipídicos, y sobre la remoción de Col mediada por apo A-I, por microscopía de fluorescencia de dos fotones (Tricerri y col., 2002). El análisis de la Polarización Generalizada (GP) de la sonda Laurdan en la membrana, es un buen parámetro de distribución y composición de dominios coexistentes en la bicapa, indicando la fluidez asociada a cada región. Observamos que, si bien viabilidad celular y la fluidez total de la membrana es similar en células control y en las que sobreexpresan la desaturasa, ambas responden de manera distinta tanto al agregado, como a la remoción de Col por distintos aceptores. Asimismo, observamos un aumento en la relación Col libre/Col esterificado (CE) en las células SCD-1. Esto sugiere que el aumento de la fluidez inducido por la sobreexpresión de la desaturasa, sería compensado por un aumento de Col (a expensas del CE intracelular), y una distribución diferencial del mismo en los dominios de la membrana. Esto resultaría en una disminución de la remoción del Col por la apoA-I, y en un “efecto protector” frente al exceso de Col (por agregado exógeno), como se comprobó por el ensayo de MTT.