INIBIOLP   05426
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE LA PLATA "PROF. DR. RODOLFO R. BRENNER"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Expressão gênica de fotoliases em Metarhizium spp. crescidos em meio enriquecido com riboflavina e expostos à radiação ultravioleta (UV-A ou UV-B) e luz visível
Autor/es:
PEREIRA-JUNIOR, R.A; HUARTE BONNET, CARLA; PAIXÃO, F.R.S; ROBERTS, DONALD; RANGEL, DRAUZIO; MARRETO, RICARDO; LUZ, CHRISTIAN; PEDRINI, NICOLÁS; FERNANDES E.K
Lugar:
Teresópolis
Reunión:
Simposio; 14º Simposio de controle biológico; 2015
Resumen:
A eficácia de fungos entomopatogênicos,como Metarhizium spp., para controlebiológico de vetores ainda tem sido limitada, uma vez que estesmicrorganismossão susceptíveis a fatores abióticos de estresse, como a radiaçãosolar ultravioleta.O presente estudo investigou a resposta de Metarhizium spp. àexposição àradiaçãoUV(UV-A e UV-B) quando crescidos em meio suplementado com riboflavina,por meioda expressão gênica de fotoliases.Foram utilizados os isolados ARSEF 2575 (M. robertsii) e ARSEF 324 (M. acridum). Os isolados foramcultivados em meio BDA (batata dextrose ágar), com ou sem riboflavina, noescuro a 27 ± 1°C por 15 dias. Os fungos foram expostos à radiação UV-A (100,8kj.m-2) ou UV-B(3,9 kj.m-2)e expostos ou não à luzvisível (16 W.m-2) após a radiação UV. Foi feita a extração de RNAtotal, a síntese da primeira cadeia de cDNA e, em seguida, as amostras foramestudadas quanto à expressão gênica de fotoliases por PCR em tempo real. Foirealizada análise de variância (ANOVA) e teste SNK.Foram estudados um gene paraM. acridum e 2 genes (CDP e 6-4fotoliases) para M. robertsii. Osdados de CDP fotoliase para M. robertsii,assim como os de fotoliase para M. acridum,evidenciaram que estegenefoiexpresso, em maior quantidade, em fungos expostosàradiação (UV-A ou UV-B) ou luz visível, quando comparados às culturas nãoexpostas. No entanto, em geral, não houve diferença significativa entre ascondições de cultivo e de exposição, apesar de CDP fotoliase de M.robertsiicultivado em meio enriquecidocom riboflavina ter apresentado maior expressãoao associar radiação UV-A ouUV-B com luz visível. Já em relação a 6-4-fotoliase em M. robertsii, observou-se que todos os cultivos em meio contendoriboflavina e expostos a UV-A, ou combinação de UV-A ou UV-Be luz visível,apresentaram significativamente maior expressão deste gene, indicando provávelpotencialização da expressão de 6-4- fotoliase causada pelo acréscimo deriboflavina ao meio de cultivo. Isto se deve, possivelmente,ao fato docomprimento de onda de UV-A ser suficiente para ativação da expressão da6-4-fotoliase, fazendo com que ela, mesmo sem posterior exposição à luzvisível, já seja capaz de estimular o aumento de expressão deste gene. Estesdados, portanto, sugerem que a 6-4- fotoliase possui um papel importante dereparação emM. robertsii, sendo que oacréscimo de riboflavina ao meio potencializa sua expressão gênica, conferindopossivelmente maior tolerância. No entanto, a expressão dasfotoliasesemM. acridumparece não ser influenciadapela adição de riboflavina ao seu cultivo.