INIBIOLP   05426
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOQUIMICAS DE LA PLATA "PROF. DR. RODOLFO R. BRENNER"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Agregados de apolipoproteina AI humana. Estudios con mutantes de cisteina marcados con pirenilmaleimida
Autor/es:
TARRAGA W; GONZALEZ MC; FALOMIR L; HERNÁNDEZ LE; TOLEDO JD; GARDA HA
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; II Congreso Internacional de la Facultad de Ciencias Médicas; 2015
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Médicas, UNLP
Resumen:
Introducción:La apolipoproteína A-I (apoAI) es la proteínamayoritaria de las lipoproteínas de alta densidad (HDL) a las que se lesatribuye un rol antiaterogénico, en especial por su participación en eltransporte del exceso de colesterol desde tejidos periféricos hacia el hígadopara su catabolismo y eliminación. ApoAI está constituida por a-hélices anfipáticas que en agua forman unramillete de estructura terciaria poco definida o glóbulo fundido; y que enfunción de la concentración se autoagrega para formar dímeros y oligómeros dediferente tamaño.Objetivos:Obtener información sobre la autoagregaciónen solución e interacción con membrana de ApoA-I  ya que es importante para comprender losmecanismos de generación de HDL, así como la amiloideogénesis.Materiales y métodos:Aquí se usaron seis mutantes de cisteína(K107C, K133C y K226C, F104C, L137C y F225C), las que se marcaronespecíficamente con pirenil-maleimida en estas seis posiciones que correspondena las hélices 4, 5 y 10, respectivamente.Resultados:Los espectros de emisión en función de laconcentración proteica mostraron que la formación de excímeros de pireno ocurresólo en el caso de las mutantes marcadas en la hélice 5 y 10, indicando laparticipación de éstas hélices en las regiones de contacto para laoligomerización. Al mismo tiempo los espectros de fluorescencia en presencia devesículas muestran un incremento en la fluorescencia y un cambio espectralsignificativo con la mutante L137C en presencia de vesículas.Conclusiones: Del análisis de los espectros de emisión delpirenilo en solución y en presencia de vesículas con estas mutantes se concluyeque la hélice 10  se encuentra en unentorno relativamente más polar que las hélices 4 y 5 cuando ApoA-I seencuentra en solución en estado monomérico. Las hélices 5 y 10 son regiones decontacto para la oligomerización y la hélice 5 se inserta en membrana.