Genes del integumento y resistencia a insecticidas en Triatoma infestans (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae)

CALDERÓN FERNÁNDEZ, GUSTAVO M.; JUÁREZ, M. PATRICIA

Posadas

Congreso; IX Congreso Argentino de Entomología; 2015

Sociedad Argentina de Entomología

El integumento es el tejido más externo del cuerpo de los insectos, y comprende la cutícula y el tejido epidérmico subyacente. La cutícula consiste en una delgada capa más externa llamada epicutícula, formada mayormente por lípidos y lipoproteínas, e internamente una gruesa procutícula formada por quitina embebida en una matriz de numerosas proteínas cuticulares. Tras su formación, parte de la cutícula se esclerotiza a partir de una secuencia de reacciones enzimáticas llevadas a cabo sobre proteínas cuticulares específicas, volviéndose rígida y muy resistente. El tejido epidérmico está formado por diversos tipos celulares, tales como las células epidérmicas, los oenocitos, las glándulas dermales, que intervienen en la formación de los componentes cuticulares y su secreción, y participan activamente en otros procesos metabólicos del organismo. Los lípidos cuticulares comprenden componentes de cadenas hidrocarbonadas largas y muy largas, apolares, que incluyen principalmente hidrocarburos, alcoholes grasos, ceras y ácidos grasos. Las ácido graso sintasas (FAS), ácido graso elongasas (ELOVL) y acil-CoA reductasas (FAR) son las enzimas clave en la biosíntesis de los lípidos cuticulares. Las proteínas cuticulares estructurales incluyen varias familias de proteínas de unión a quitina que forman el grueso de la cutícula; las principales familias encontradas comprenden las CPR y CPAP. El integumento tiene un rol esencial en la supervivencia, metabolismo general, fisiología y comunicación de los insectos. En T. infestans se demostró que el incremento en el grosor cuticular y en el contenido de hidrocarburos se relaciona con la resistencia a insecticidas. En este trabajo, se extrajo RNA total a partir de tejido epidérmico de T. infestans y se llevó a cabo la secuenciación de alto rendimiento del transcriptoma en plataforma 454 GS FLX, obteniendo la secuencia de numerosos genes relacionados al metabolismo de componentes cuticulares, transporte de lípidos, detoxificación de sustancias, inmunidad y numerosos procesos fisiológicos del organismo. Se analizó mediante PCR cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) la expresión de diversos genes relacionados al metabolismo de lípidos cuticulares, proteínas cuticulares estructurales y detoxificación de xenobióticos, en ejemplares susceptibles y resistentes a insecticidas. En los ejemplares resistentes a insecticidas, se observó una expresión significativamente diferente en varios genes de ELOVL y FAR, proteínas cuticulares de la familia CPR con motivo RR-1 y citocromo P450 entre otros, llegando a más de 30 veces en algunos casos. Estos resultados sugieren que la expresión diferencial de varios genes del integumento puede contribuir a la resistencia a insecticidas en T. infestans, no solamente disminuyendo la penetración de los insecticidas, sino también mediante su detoxificación durante su tránsito a través del integumento.