LAS ALFA-HELICES CENTRALES DE APOLIPOPROTEÍNA AI ESTÁN INVOLUCRADAS EN LA MOVILIZACIÓN DE POOLES INTRACELULARES DE COLESTEROL EN CÉLULAS CHOKI

GONZALEZ, M. C.; TOLEDO, J. D.; TRICERRI, M. A.; GARDA, H. A.

La Plata, Facultad de Ciencias Médicas

Jornada; Jornadas científicas de la Facultad de Ciencias Médicas; 2007

Facultad de Ciencias Médicas

Introducción: Apolipoproteina AI (apoA-I) es la proteína mayoritaria de las lipoproteinas de alta densidad (HDL) y juega un rol central en la remoción del colesterol (Col) celular, proceso de gran importancia antiaterogénica. Su interacción con sitios específicos de la membrana celular activa diferentes señales intracelulares las cuales resultan en la movilización hacia la membrana plasmática de pooles específicos de Col como el disponible para la esterificación por  acil-CoA:colesterol acil transferasa (ACAT). Así, HDL cargadas de Col son liberadas a la circulación donde son transformadas por LCAT en las especies predominantes esféricas. Previos resultados de nuestro laboratorio indicaron que la interacción de HDL discoidales con membranas lipídicas es mediada por la inserción del par central de α-hélices anfipáticas, las cuales tienen una distribución característica de cargas en su carga polar. Para obtener información sobre los requerimientos de esta región central de apoA-I, hemos estudiado la capacidad de apoA-I y de dos mutantes de la misma en modificar la fracción de Col sintetizado de novo accesible a ser oxidado por el tratamiento exógeno con colesterol oxidasa. También hemos analizado el eflujo de Col y la movilización del pool de Col accesible a ACAT. El dominio central de apoA-I adopta conformaciones alternativas en HDL discoidales, dependiendo del tamaño y del contenido de Col. Hemos postulado que dichas conformaciones alternativas, en especial las que conciernen al dominio central modulan la interacción con células y la capacidad de inducir movilización intracelular del Col. H9-10@H3-4 y ApoA-I fueron efectivas en promover la movilización del Col recientemente sintetizado y también del pool específico de Col accesible a ACAT hacia la membrana plasmática. La deleción del residuo de lisina de apoA-I resultó en la pérdida total de la habilidad para inducir la movilización intracelular del Col en células CHO-KI. Estos resultados podrían atribuirse a la pérdida de la carga positiva en la región central de apoA-I  pero en el caso de H9-10@H3-4 también tiene ausente la carga en la misma posición. Un cambio estructural mas importante en ΔK107 es que la deleción de este aminoácido cambia la orientación del resto de los aminoácidos de esta α-hélice en aproximadamente 100°. Este cambio en la orientación de la hélice  podría afectar la interacción con lípidos como así también con proteínas de membrana involucradas en la señalización intracelular que conduce a la movilización de pooles intracelulares de Col. Las rHDL de gran tamaño y enriquecidas en colesterol, aunque pueden intercambiar colesterol con células, son incapaces de movilizar el pool recientemente sintetizado. La conformación del dominio central de apoAI en estas partículas podría disminuir su afinidad por la membrana celular o impedir de alguna manera la interacción con las  proteínas celulares que desencadenen el proceso de señalización.