Las alfa-hélices centrales de apolipoproteína A-I están involucradas en la movilización de pooles intracelulares de colesterol en células CHOK1

GONZALEZ MC; TOLEDO JD; TRICERRI MA; GARDA HA

Departamento de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes. Bernal (Bs Aires)

Taller; Taller de la Sociedad Argentina de Biofísica "Biofísica de Macromoleculas: Aspectos Estructurales e Implicancias Biológicas y Biotecnológicas"; 2007

Sociedad Argentina de Biofísica

    Apolipoproteína A-I (apoA-I) juega un rol central en la remoción de colesterol (Col) celular, proceso de gran importancia antiaterogénica. Su interacción con sitios específicos de la membrana celular activa diferentes señales intracelulares las cuales resultan en la movilización hacia la membrana plasmática de pooles específicos de Col como el disponible para esterificación por acil-CoA:colesterol acil transferasa (ACAT). Previos resultados de nuestro laboratorio indicaron que la interacción de HDL discoidales con membranas lipídicas es mediada por la inserción del par central de alfa-hélices anfipáticas. Para obtener información sobre los requerimientos de esta región central de apoA-I, hemos estudiado la capacidad de apoA-I y de dos mutantes de la misma en modificar la fracción de Col sintetizado de novo accesible a ser oxidado por el tratamiento exógeno con colesterol oxidasa. El dominio central de apoA-I adopta conformaciones alternativas en HDL discoidales, dependiendo del tamaño y contenido de Col. Hemos postulado que dichas conformaciones alternativas, en especial las que conciernen al dominio central modulan la interacción con células y la capacidad de inducir movilización intracelular del Col.      Los resultados indican que la deleción del residuo K107 resulta en un gran impedimento para movilizar pooles intracelulares de Col. Sin embargo, el reemplazo del par de hélices Y centrales 3-4 por el par terminal 9-10 no tiene influencia sobre la actividad de apoA-I en generar dichas respuestas. Un cambio estructural importante en   K107 es que la deleción de este aminoácido cambia la orientación del resto de los aminoácidos de esta  -hélice en aproximadamente 100º. Este cambio en la orientación de la hélice podría afectar la interacción con lípidos como así también con proteínas de membrana involucradas en la señalización intracelular que conduce a la movilización de pooles intracelulares de Col.    Las rHDL de gran tamaño y enriquecidas en colesterol, aunque pueden intercambiar colesterol con células, son incapaces de movilizar el pool recientemente sintetizado. La conformación del dominio central de apoAI en estas partículas podría disminuir su afinidad por la membrana celular o impedir de alguna manera la interacción con las proteínas celulares que desencadenan el proceso de señalización.