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ALTERACIONES METABÓLICAS EN RATONES ATÍMICOS: EFECTOS DE LA TERAPIA GÉNICA NEONTAL CON TIMULINA Margarita M. García. de Bravoa, , Mónica P.Poloa, Paula C.Reggianib, Omar J.Rimoldic,d y Rodolfo G.Goya a Cátedra de Biología, b Cátedra de Citología, Histología y Embriología B, c Cátedra de Bioquímica, d Cátedra de Genética Instituto de Investigaciones Bioquímicas de La Plata (INIBIOLP) Introducción Los ratones congénitamente atímicos, también llamados ratones nude, presentan una severa inmunodeficiencia, un disbalance endocrino y desarrollan durante la adultez una moderada hiperglucemia así como alteraciones también moderadas a nivel del páncreas endocrino. En cambio hay muy poca información sobre el metabolismo lipídico de estos ratones mutantes. La timulina es una hormona tímica involucrada en diversos aspectos de la diferenciación intra- y extratímica de las células T. Esta hormona, que es producida exclusivamente por las células epiteliales tímicas (TEC), consiste en un nonapéptido biológicamente inactivo (facteur thymique sérique o FTS) coordinado al ión Zn+2 en una relación equimolecular, lo cual confiere a esta molécula su actividad biológica característica. Tiene una acción inmunomodulatoria y posee actividad hipofisotrófica. Algunas líneas de estudio sugieren que existen factores tímicos poseedores de actividad modulatoria sobre el metabolismo lipídico. En efecto, se ha descripto que ciertas preparaciones tímicas reducen los niveles séricos de colesterol, incrementan el catabolismo de las lipoproteínas de baja densidad e inhiben la actividad de la 3-hidroxi-metilglutaril (HMG)-CoA reductasa hepática (la enzima limitante de la síntesis de colesterol) en roedores. En virtud de que la timulina atraviesa la barrera hematoencefálica y carece de efectos tóxicos aun en altas dosis, la inyección intramuscular de vectores virales que expresen timulina o sus análogos bioactivos, podría permitir instaurar niveles sostenidos y farmacológicamente efectivos de timulina en suero y tejidos a fin de tratar diversas patologías derivadas del déficit de hormonas tímicas Objetivo: En este estudio nosotros continuamos determinando cual es el impacto de la atimia congénita sobre los niveles de glucosa, triacilglicéridos y colesterol plasmáticos, como asi también sobre la composición de los lípidos hepáticos en ratones nude machos adultos. Paralelamente estudiamos si la terapia génica neonatal con timulina es capaz de prevenir las alteraciones metabólicas producidas por la atimia congénita en la edad adulta. Materiales y Métodos: Para ello se construyó un vector adenoviral recombinante, Rad-metFTS, que expresa una secuencia sintética de ADN codificando met-FTS, un análogo del péptido timulina. Al primer o segundo día de vida se inyectaron ratones homocigotas (nu/nu) y heterocigotas (nu/+) intraperitonealmente con 108 pfu de RAdmetFTS o RAd-GFP (vector control). Los animales fueron sacrificados a los 70-71 días. Se determinó timulina sérica por un bioensayo, colesterolemia, trigliceridemia y glucemia utilizando kits comerciales. Se estudiaron los lípidos hepáticos por técnicas de cromatografía en capa fina (TLC) y cromatografía gas líquida (GLC) determinándose contenido de triacilglicéridos, coleterol tisular y microsomal y composición en ácidos grasos de fosfolípidos y lípidos neutros. Resultados Como esperábamos, los animales nu/nu controles fueron moderadamente hiperglucémicos comparados con los animales nu/+ heterocigotas (109.4±11.8 vs. 87±5.0 p< 0.05), pero esta condición fue prevenida en el adulto atímico que había sido objeto de la terapia génica neonatal con timulina (nu/nu control:109.4±11.8; nu/un tratado: 73.9±5.0; P<0.01). Los animales nude adultos son hipotrigliceridémicos e hipocolesterolémicos, pero esta alteraciones no fueron prevenidas por la terapia génica. No se encontraron diferencias significativas en el contenido de colesterol tisular ni microsomal entre animales heterocigotas y homocigotas pero la terapia génica bajó los niveles de este último valor en ambos grupos de animales. El contenido de ácidos grasos monoinsaturados es menor tanto en fosfolípidos como en microsomas en los animales atímicos, condición que tampoco se previene con la terapia génica con timulina. ConclusionesLos ratones nu/nu adultos desarrollan múltiples alteraciones en el metabolismo lipídico y glucídico. El factor tímico timulina podría modular algunas de estas variables metabólicas, especialmente la homeostasis de la glucosa.