Análisis estructural y biofísico de As-p18.

IBAÑEZ, MARINA; CÓRSICO B

BUENOS AIRES

Congreso; XXXv Congreso de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

SAB

Las nemFABP constituyen un grupo de proteínas de unión a ácidos grasos con características estructurales únicas para nematodes, notables por poseer secuencias señales de secreción y por ser liberadas desde las células sintetizadoras. As-p18, una nemFABP del parásito Ascaris suum, es uno de los componentes más abundantes en el fluido que rodea a la larva en desarrollo y se cree que pueda estar involucrada en el mantenimiento de la capa lipídica dentro de la resisente estructura de los huevos de Ascaris (1). Mientras que los estudios por modelado muestran que su secuencia se ajusta bien a una FABP de 10 cadenas organizadas en dos hojas ortogonales, hay indicios de modificaciones en el sitio de unión que podrían estar relacionados a la especificidad del ligando. Además, los segmentos adicionales inusuales expuestos en la superficie de la proteína podrían estar involucrados en interacciones proteína-proteína insospechadas (2). A fin de determinar la estructura tridimensional de As-p18, se adquirieron y analizaron experimentos de Resonancia Magnética Nuclear. Se presenta aquí la estructura en solución que se encuentra en proceso de refinamiento y el análisis de interacción con ligando derivado de experimentos de NMR filtrados por isótopo (3). Para la caracterización funcional se realizaron además ensayos basados en técnicas fluorimétricas que permiten evaluar las propiedades de unión a ligando así como la interacción proteína-membrana . La afinidad por el análogo fluorescente del ácido palmítico, 16AP, está siendo determinada junto con el mecanismo de transferencia a modelos de membranas aceptoras. Por último, dentro del estudio del entorno lipídico de As-p18 recombinante expresada en Escherichia coli, se evidenció una preferencia de unión a ácidos grasos saturados (71% abundancia relativa), mientras que el 29% remanente constituido por ácido grasos insaturados, mostró al 18:1 como componente mayoritario, seguido del 16:1. El desarrollo de una mejor comprensión de la relación estructura función de este singular grupo de proteínas presentes en nematodes nos acercará al conocimiento de su rol biológico y su relevancia en la supervivencia del parásito.