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El objetivo del presente estudio fue evaluar la estructura y composición de los ensambles de quironómidos (Diptera: Chironomidae) en el arroyo Ventana, provincia de Buenos Aires durante un período bianual. Las muestras fueron obtenidas en otoño y primavera de 2011 y 2012. Se escogieron 4 sitios a lo largo de 12 km: sitio 1 en la cabecera del arroyo (782 msnm), sitios 2 y 3 en el tramo intermedio (574 y 518 msnm respectivamente), y sitio 4 ubicado aguas abajo (342 msnm). Los sitios 1, 2 y 3 permanecen como ?pozones? aislados que se conectan luego de las lluvias, mientras que el sitio 4 permanece como un ambiente lótico de forma permanente. Las muestras (3 réplicas) fueron obtenidas con una red de tipo D-net en cada sitio durante 60 segundos sobre la vegetación y el sustrato, y conservadas en alcohol al 70% hasta su posterior análisis. En cada sitio, se obtuvieron datos físico-químicos del agua. Se recolectaron muestras adicionales de inmaduros de quironómidos con el fin de realizar su cría bajo condiciones de laboratorio y así obtener los ciclos completos para lograr una identificación a nivel de especie. Como resultado de los muestreos realizados, se identificaron quironómidos pertenecientes a 4 subfamilias: Orthocladiinae con 5 géneros (7 spp.), Chironominae con 4 (5 spp.), Tanypodinae con 5 (5 spp.), y Podonominae con 1 (2 spp.). El sitio 1 fue el que mostró una menor riqueza y diversidad. La subfamilia Orthocladiinae fue dominante en los sitios 1 a 3, seguidas por Tanypodinae y Podonominae. Por otro lado, la subfamilia Chironominae fue dominante en el sitio 4, seguida por Orthocladiinae y Tanypodinae, estando ausente la subfamilia Podonominae. El análisis de Jaccard ó similitud entre sitios, mostró una mayor similitud entre los sitios 1-2, y luego entre el 1-3 y 2-3, mientras que el sitio 4 mostró valores bajos de similitud con los sitios 1, 2 y 3. Se aplicó un análisis multivariado de ordenamiento lineal (RDA), debido a que el análisis DCA arrojó una longitud de gradientes >2. Inicialmente se utilizaron 19 especies y 8 variables ambientales (nutrientes, físico-químicos, tipo de sustrato y altura), eliminándose luego las variables con un VIF≥20 y aquellas que correlacionaron, quedando en el análisis 5 variables ambientales: [P-PO4], [O2] disuelto, conductividad, altura y presencia de sustrato blando en el lecho. Estas variables explicaron en conjunto un 89% de la variabilidad total. Para dicho análisis, el test de Monte Carlo con un nivel de confianza del 95% arrojó que todos los ejes extraídos fueron significativos (p=0,004). Como resultado del RDA se observó que el sitio 4 se separa de los sitios 1, 2 y 3, principalmente por el tipo de sustrato y por la conductividad.