Esterificación de R/S-ketoprofeno con isopropanol como reactivo y solvente catalizada por Novozym® 435 bajo condiciones seleccionadas

MARÍA VICTORIA TOLEDO; SEBASTIÁN E. COLLINS; RITA D. BONETTO; MARÍA LUJÁN FERREIRA; LAURA E. BRIAND

La Plata

Encuentro; V Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2012

Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones

Los fármacos derivados del ácido 2-aril propiónico son mezclas racémicas pertenecientes a la familia de los antiinflamatorios no-esteroideos o AINEs cuya actividad farmacológica reside en uno de sus enantiómeros, generalmente el isómero S(+). Hoy día, el biocatalizador comercial Novozym®435 es ampliamente utilizado en la esterificación enantioselectiva de ácidos carboxílicos racémicos [1]. Este catalizador está compuesto por esferas de polimetilmetacrilato (PMMA) sobre las que se encuentra inmovilizada físicamente la lipasa B de Candida antarctica (CALB). En esta investigación se estudia la esterificación enzimática de R/S-ketoprofeno con isopropanol catalizada con Novozym® 435. La baja velocidad de reacción registrada se investigó en términos del efecto del alcohol en la estabilidad fisicoquímica y enzimática del biocatalizador y la interacción de los sustratos con la tríada catalítica a nivel molecular. Se evaluó el efecto del contacto de la mezcla isopropanol:H2O en Novozym® 435 luego de un periodo de 8 días a 45 °C. Se observó que la mezcla disuelve el PMMA y que, además, el alcohol penetra en las esferas del biocatalizador permaneciendo fuertemente absorbido (la desorción del mismo sólo es evidenciada al calentar a 187 °C) y alterando su textura interior. Adicionalmente, el isopropanol modifica la estructura secundaria de la enzima disminuyendo la contribución de láminas β y aumentando los giros β. El modelado molecular de la interacción de R/S-ketoprofeno e isopropanol con la triada catalítica de la lipasa evidencia un impedimento estérico del alcohol secundario