Rol de la proteína fijadora de AMPc (EPAC) en la contractilidad de miocitos cardíacos

LUCOTTI I; LEZCANO N; MUNDIÑA - WEILENMANN C

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)

En el corazón, el AMPc es un regulador clave en la contracción, relajación y automatismo. Si bien sus efectos se relacionan principalmente con la activación de la proteína quinasa dependiente de AMPc (PKA), nuevos efectores de este segundo mensajero han sido descubiertos. Las Epac son proteínas que se activan por unión al AMPc e intercambian nucleótidos de guanina en las proteínas Rap. El impacto funcional de su activación en miocitos aislados es controversial. Nuestro objetivo fue estudiar el efecto de un activador selectivo de Epac, 8-(4-clorofeniltio)-2´-O-metiladenosina-3´-5´-monofosfato cíclico (8-CPT), sobre la contractilidad y el manejo del calcio intracelular en miocitos aislados de rata adulta. Para ello registramos simultáneamente los cambios en la longitud del sarcómero y el calcio intracelular en miocitos cargados con Fura2-AM estimulados a 0.5 Hz antes y después del tratamiento con 10 M 8-CPT. 8-CPT no produjo cambios en la longitud de reposo del sarcómero pero si en el acortamiento (de 7,84±1,09 a 2,63±1,42 expresado como % de la longitud de reposo del sarcómero, n=4 p<0,05). Esto se correlacionó con una disminución de la amplitud del transitorio de calcio, estimado como la diferencia entre el pico y la línea de base de la relación de fluorescencia 340/380 (100±4.81 a 71.75±10.26% del basal luego del tratamiento con 8-CPT, n=4 p<0,05). La constante de tiempo (Tau) de la relajación del sarcómero y de la caída del transitorio de calcio, fue significativamente mayor en presencia de 8-CPT, indicando un enlentecimiento de la remoción del calcio intracelular durante la relajación. Los resultados indican que la activación de Epac tiene un efecto inotrópico negativo que podría explicarse por un manejo alterado del calcio intracelular y sugieren un rol inhibitorio de Epac sobre las proteínas que manejan el calcio intracelular. Este efecto del AMPc sobre Epac podría co-existir con la estimulación de PKA durante la estimulación beta-adrenérgica en el miocardio.