Caracterizacion del intercambio Cl-/HCO3- en neutrófilos humanos

GIAMBELLUCA, MS; GENDE, OA

Facultad de Ciencias Medicas, UNLP, La Plata

Congreso; Congreso Anual de la Sociedad Argentina de Fisiologia; 2009

Sociedad Argentina de Fisiologia

Se utilizaron neutrófilos cargados con el indicador fluorescente BCECF para caracterizar el intercambiador anionico Cl-/HCO3- (AE). La transferencia de un medio  con HCO3-/CO2 a otra solución amortiguadora libre de Cl- produjo un aumento del pH citosólico (pHi). El agregado de NaCl 50 mM (concentración final) provocó la recuperación del pHi con una velocidad (en unidades de pH/seg.10-4) de 9 ± 2 en el control y 0.5 ± 0.7 (P<0.02) cuando se inhibió la anhidrasa carbónica con metazolamida 1 mM. Trimetilamina 25 mM provocó una alcalinización intracelular de la que se recuperaron con una velocidad de 8 ± 1 en el control y 5 ± 1 en metazolamida 1 mM (P<0.05). El bloqueo del intercambio Na+/H+ con EIPA 2 µM no afectó esta respuesta. En neutrófilos alcalinizados por lavado del CO2, la reintroducción de NaCl en presencia de EIPA redujo el pHi con una velocidad de 6.6 ± 0.2 en el control y de 12 ± 1 (P<0.05) con el agente quimiotáctico fMLP 0.1µM. Se concluye que en los neutrófilos el AE está asociado funcionalmente a la anhidrasa carbónica sugieriendo la existencia de un metabolon que agrupa ambos sistemas, como se ha descripto para otras células. Además se demuestra que el fMLP, que activa el intercambio Na+/H+ frente a una sobrecarga ácida, también es capaz de activar directamente el AE frente a sobrecargas alcalinizantes.