CIC   05421
CENTRO DE INVESTIGACIONES CARDIOVASCULARES "DR. HORACIO EUGENIO CINGOLANI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Rol de la pérdida de Ca2+del retículo sarcoplasmático (RS), la relación RS-mitocondria, ultraestructura del tejido miocárdico y la expresión de Mfn-2 y GRP75 en la apoptosis del corazón pre-diabético.
Autor/es:
LÓPEZ S; ALICIA MATTIAZZI; ZAVALA M; J. PALOMEQUE; FEDERICO, MARILEN; VILLA ABRILLE MC
Reunión:
Congreso; Sociedad Argentina de Hipertension Arterial SAHA; 2019
Resumen:
Corazones pre diabéticos presentan alteración en el manejo de Ca+2 y en la actividadde la Ca+2 calmodulina kinasa II (CaMKII), disfunción mitocondrial y aproximación de la mitocondria(mit) y el retículo sarcomplasmático (RS), junto con apoptosis. Hipótetizamos que en estoscorazones, cambios en las proteínas que participan en los movimientos de Ca+2 a través de lasorganelas (VDAC), y en el anclaje de ambas entre sí (Mfn2 y GRP75) y alteracionesultraestructurales dependientes de CaMKII, alteran la comunicación RS-mit aumentando el Ca+2mitocondrial y la apoptosis. Objetivos: comprobar nuestra hipótesis. Materiales y métodos:utilizamos ratones C57 (WT), AC3I (contienen un inhibidor de CaMKII) y S2814D (el canal derianodina [RyR] esta constitutivamente pseudofosforilado por CaMKII); que se alimentaron condieta control (DC) o dieta rica en fructosa (DRF). Se realizaron ensayos de unión de [3H]rianodina([3H]Ry), western blot, microscopia electrónica de transimisión (MET), aislamiento demitocondrias y de miocitos. Resultados: Por microscopía confocal se encontró significativamenteaumentada la producción de chispas de Ca+2 (1675±819%), ondas de Ca+2 (360±80%) ycontracciones espontáneas (312.5±43%) en los miocitos de WT DRF vs WT DC. Los ensayos deunión de [3H]Ry resultaron en una Vmax de los RyR de WT DRF significativamente mayor vs WT DCy AC3I DRF (48±5 ftmol/mg prot WT DRF ; 33±4 WT DC; 32±5 AC3I DRF). La Vmax de S2814D DC(65±10) no difiere de los WT DRF, sugiriendo una fosforilación del RyR similar entre ambas líneas.La expresión de Mfn2 se encontró significativamente aumentada en los DRF (WT [53±12%] y AC3I[91±22%]), y la de GRP75 se incrementó solo en los WT DRF (38±10%). La expresión de VDAC no semodificó. Por TEM, se observó desorganización ultraestructural y uniones entre RS-mit en los WTDRF. Se observó también una disminución en la capacidad buffer de las mitocondrias WT DRF vsDC (9.7±1.1 vs 14±2.1). Conclusión: En los corazones pre diabéticos la pérdida de Ca+2 se producepor un aumento de actividad de los RyR dependiente de CaMKII, el incremento de GRP75 y Mfn2podría explicar la aproximación SR-mit, las mit estarían sobrecargadas de Ca+2 y la desorganizacióndel tejido podría estar vinculada con las alteraciones observadas Los resultados indicarían que eltráfico de Ca+2 hacia la mit esta aumentado.