Pérdida vs. secuestro de Calcio por el retículo sarcoplasmático (RS) en la prevención de arritmias y daño miocárdico por isquemia y reperfusión (I/R).

CIOCCI PARDO, ALEJANDRO; FELICE, JUAN I; SAID M; DI CARLO, MARIANO N; MOSCA, SUSANA; MATTIAZZI, ALICIA; CELY-ORTIZ, ALEJANDRA; MAZZOCCHI, GABRIELA; PORTIANSKY, ENRIQUE; VALVERDE, CARLOS A

La Plata

Jornada; Jornadas de Medicina 2018; 2018

Facultad de Ciencias Médicas, UNLP

Introducción: Lasarritmias disparadas por calcio (Ca2+) constituyen una de las formasprincipales de arritmias mortales en patologías como la insuficiencia cardíaca(IC) y en eventos isquémicos seguidos de reperfusión (I/R). Este tipo dearritmias ocurre debido a una pérdida anormal de Ca2+ por loscanales liberadores de Ca2+ (RyR2) del RS que puede producirse porsobrecarga de Ca2+ del RS y/o alteración de los RyR2. La pérdida de Ca2+se esparce a sucesivos RyR2, generando una onda de Ca2+ que sepropaga por el citosol. El Ca2+ es extruido de la célula a travésdel intercambiador Na+/Ca2+, que despolariza la membranacelular por introducir un exceso de cargas positivas a la célula. Si estadespolarización llega al umbral deexcitabilidad, origina un potencial de acción y en consecuencia un latidoectópico. Por otra parte, la pérdida de Ca2+ por el RyR2 puedeproducir sobrecarga de Ca2+ mitocondrial, debido a la íntimaasociación entre el RS y las mitocondrias, que se asocia a muerte celular (Ver Figura).Trabajos de nuestro y otros laboratorios, han demostrado que la pérdida de Ca2+por fosforilación del RyR2 por la quinasa dependiente de Ca2+ ycalmodulina (CaMKII) en el sitio 2814, está asociada a las arritmias y lamuerte celular tanto en la I/R como en la IC. En cambio, el rol del aumento delsecuestro de Ca2+ en dichas patologías, es controvertido. Elconocimiento del efecto del aumento del secuestro de Ca2+ es muy importanteya que si bien ha sido propuesto como terapéutica para mejorar lacontractilidad en la IC (actualmente sujeto a ensayos clínicos), dichotratamiento tiene un potencial impacto negativo, ya que podría facilitar lapérdida de Ca2+ por el RS, las arritmias y el daño miocárdico. Objetivos: Usando un modelo de I/R,evaluamos la hipótesis que unaumento del secuestro de Ca2+ es capaz de disminuir las arritmias dereperfusión y la muerte celular asociadas al aumento en la fosforilación del residuo2814 del RyR2. Materiales y métodos:Se realizaron estudios in vivo, encorazones perfundidos y miocitos aislados de ratones a. silvestres, b. conaumento en la perdida de Ca2+ del RS por mutación del residuoSer2814 del RyR2 a Asp (S2814D), c. con el residuo Ser2814 mutado a Ala ypor lo tanto con menor pérdida de Ca2+ (S2814A), d. con aumentodel secuestro de Ca2+ por ablación de fosfolamban -proteína queinhibe a la bomba de Ca2+ del RS- (PLNKO), y e. ratonesresultantes de la cruza de PLNKO con S2814D (SDKO) y S2814A (SAKO).Se evaluaron arritmias (ECG), estructura y función cardíaca (ETT), tamaño deinfarto (TTC) sometidos a un protocolo de I/R (15/30 min), Ca2+intracelular en el corazón intacto por microscopía confocal y funciónmitocondrial. Los datos expresados como media ± SEM, se evaluaron con el testStudent para muestras no apareadas o el test de ANOVA seguido del post hoc testde Tukey. Una diferencia de P