LA VAPORIZACION DE MARIHUANA AFECTA LA FUNCION CARDIACA DE DROSOPHILA

SANTALLA MANUELA; ARANDA OSWALDO; VALVERDE CARLOS A; RODRÍGUEZ MAIA; KASISS GEORGE; SEDÁN DANIELA; FERRERO PAOLA; GÓMEZ IVANA; COLMAN LERNER JE; ANDRINOLO DARÍO

La Plata

Jornada; Jornadas de Investigación 2018; 2018

Facultad de Ciencias Médicas UNLP

Introducción: La planta de Cannabis sp. presenta efectos analgésicos, antieméticos, anticonvulsivantes, antiespásticos y orexigénicos. Sin embargo, la evidencia científica que respalde la indicación en pacientes es muy escasa, debido principalmente a las prohibiciones de su uso, hasta la reciente ley que habilitó el consumo medicinal. La administración de los componentes de Cannabis sp. puede ser por vía oral o inhalatoria. Esta última es más difícil de explorar en modelos animales, considerando la logística de la vaporización y el mantenimiento de los organismos, sobre todo para abordar estudios comparativos probando distintas cepas con diferente proporción de los principales cannabinoides y otros componentes. Drosophila melanogaster constituye un modelo genético de bajo costo y alto rendimiento para llevar a cabo screenings que aporten información sobre distintas cepas de marihuana, cannabinoides aislados o combinaciones. Drosophila melanogaster presenta endocannabinoides en la hemolinfa y muchos de los genes que gobiernan su desarrollo y funciones orgánicas son homólogos al humano. Múltiples vías de señalización fueron descubiertas primero en Drosophila y luego identificadas en humanos.Objetivos: Nos proponemos estudiar como el consumo crónico de fitocannabinoides modifica la función cardíaca de Drosophila melanogaster mediante un diseño experimental que permite explorar la vía inhalatoria.Materiales y métodos: El material vegetal utilizado se caracterizó previamente mediante cromatografía gaseosa acoplada a espectrometría de masa (CG-MS). Los fitocannabinoides fueron suministrados a las moscas en dos dosis diarias en forma de vapor. Aunque la mosca no inhala estrictamente, el vapor atraviesa la cutícula y se distribuye directamente a la hemolinfa mediante el sistema traqueal de intercambio gaseoso. Se analizó la sobrevida de una población control y una tratada con marihuana. Las moscas tratadas para evaluar función cardíaca se dividieron en 3 grupos: G1: recibieron tratamiento durante 6-8 días, G2: durante 11-13 días, G3: recibieron tratamiento durante 5 días y luego se interrumpió durante los 5 días siguientes. Mediante sistemas reporteros codificados genéticamente que codifican para la proteína fluorescente verde GFP, se evaluó la función mecánica y el ciclado de calcio intracelular (Ca2+)i. Las imágenes obtenidas mediante microscopía confocal fueron digitalizadas, y a partir de ellas se midieron parámetros de contractilidad, relajación y actividad de proteínas involucradas en el manejo del Ca2+ como la SERCA, RyR y NCX.Resultados: La cepa utilizada presentó alto contenido de THC, el componente psicotrópico (relación de THC/CBD= 114/1). La vida media de las moscas expuestas al extracto vaporizado no se vio afectada, lo que permitió determinar que es posible aplicar un tratamiento crónico para estudiar efectos cardíacos. La exposición a cannabis produjo disminución de la frecuencia cardíaca en los grupos G2 y G3. La relajación se prolongó en el grupo G3. Esto sugiere que un tratamiento corto es suficiente para inducir estos efectos, pero que son observados tardíamente. El índice de arritmias aumentó en el grupo G1 únicamente. Es un efecto de aparición temprana que luego revierte. El acortamiento de la pared cardíaca, que representa la contractilidad, aumentó en G2, siendo un efecto tardío y que se manifiesta con el tratamiento sostenido. El contenido de Ca2+ del retículo sarcoplasmático y la actividad de las proteínas RyR, SERCA y NCX que liberan calcio no se modificó ante el tratamiento en ningún grupo.Conclusiones: La exposición a marihuana vaporizada durante períodos cortos induce un aumento de la variabilidad de la frecuencia que se observa tempranamente y una prolongación de la relajación y reducción de la frecuencia cardíaca que se observan tardíamente. El efecto inotrópico positivo requiere mayor tiempo de exposición. Los efectos producidos en el corazón de Drosophila ocurren en ausencia de receptores canónicos. Por ende, es posible que receptores aún no conocidos medien estas respuestas.