Efecto de daunorubicina y doxorubicina en el transporte de poliaminas y la proliferación de epimastigotes de T. cruzi

RUIZ DANIELA; DE PINO, VERÓNICA; FRACCAROLI, LAURA VIRGINIA; LAROCCA LUCIANA; BALCAZAR DARIO; CARILLO CAROLINA

Resistencia, Chaco

Congreso; XXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Parasitología; 2018

Laenfermedad de Chagas es una parasitosis endémica en América Latina causada porel protozoo Trypanosoma cruzi. Lasterapias tripanocidas actuales presentan alta toxicidad por lo que existe la necesidadde identificar nuevos blancos más específicos para desarrollar nuevas terapias.Lasantraciclinas son drogas antitumorales incorporadas en humanos a través deltransportador de cationes orgánicos hOCT1,que presenta transporte de poliaminas con baja afinidad. Dado el rol esencialde las poliaminas en T. cruzi, elobjetivo de este trabajo es evaluar el efecto de las antraciclinas en laproliferación de epimastigotes y estudiar la interacción y/o incorporación dedichos compuestos a través de la permeasa de poliaminas TcPAT12.Las cepas de T. cruzi utilizadas en este estudiofueron poblaciones clonales de Y-GFP (control) y de Y-TcPAT12-GFP (sobreexpresante del transportador TcPAT12).Las antraciclinas evaluadas fueron Daunorubicina(Dnr) y Doxorubicina (Dxr).Se evaluó el efecto de Dnr y Dxr sobrela proliferación y viabilidad de epimastigotes de T. cruzi mediante curvas de crecimiento y ensayos de MTT bajodiferentes condiciones de cultivo. Dnr y Dxr afectaron significativamente laproliferación de epimastigotes tanto de la cepa control como de Y-TcPAT12-GFP. El efecto fue dosis dependiente, mostrando valores deIC50, en ambas cepas, en el rango de ~0,3 uM para Dnr y ~3,0 uM para Dxr.La depleción de putrescina en el medio (14 días) aumentó la sensibilidad deambas cepas a las antraciclinas (rangos de IC50 de ~0,1uM para Dnr y ~2,0 uMpara Dxr).Porotro lado, evaluamos el transporte de putrescina (permeasa TcPAT12),en presencia de diferentes concentraciones de Dnr y Dxr. Para evaluar laespecificidad del efecto, se estudió el transporte de arginina (TcAAAP411),lisina (TcAAP7) y riboflavina (TcRibj).Lasantraciclinas afectaron el transporte de putrescina en ambas cepas. Dnr (50uM)inhibió el transporte en un 55% en la cepa Y-GFP y20% en Y-TcPAT12-GFP,mientras Dxr (50uM) presentó una inhibición menor. La incorporación delisina, arginina y riboflavina no se vio afectada por las antraciclinas,confirmando la especificidad del efecto. Ensayos complementarios de competenciasugirieron que Dnr es un inhibidor acompetitivo del transporte de putrescina.Concluimosque Dnr y Dxr afectan la viabilidad de los epimastigotes de T. cruzi y presentan una interaccióninhibitoria con el transportador de poliaminas TcPAT12, que estaría relacionada con su capacidad tripanocida.