CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

TITULO: ?EL ESTRADIOL REGULA AL COTRANSPORTADOR SODIO/BICARBONATO (NBC) CARDÍACO? Autores: Julieta Vico; Alejandro Ibañez; Ernesto Alejandro Aiello; Verónica Celeste De Giusti.Lugar de Trabajo: Centro de Investigaciones Cardiovasculares ?Horacio E. Cingolani?, Facultad de Ciencias Médicas, UNLP-CONICET, La Plata, Argentinae-mail de contacto (IMPORTANTE): juli_vico@hotmail.comIntroducción: La regulación del pH intracelular (pHi) es de máxima importancia para el correcto funcionamiento, tanto eléctrico como mecánico, del corazón. Para ello, el corazón cuenta con mecanismos alcalinizantes y acidificantes, encargados de mantener los valores de pHi constantes. El intercambiador sodio/protón (NHE) y el cotransportador sodio/bicarbonato (NBC) son los principales mecanismos alcalinizantes, sacando H+ o introduciendo HCO3-, respectivamente. Se ha demostrado que en el corazón existen al menos dos isoformas funcionales: el NBC electrogénico (NBCe1; 1Na+/2HCO3-) y el NBC electroneutro (NBCn1; 1Na+/ 1HCO3-). Hace ya varios años que nuestro laboratorio investiga la participación del NBC en la fisiopatología cardíaca y su regulación hormonal. Hemos demostrado que la Angiotensina II activa al NHE y tiene una regulación diferencial de las isoformas del NBC, inhibiendo al NBCe1 a través de la kinasa p38 y activando al NBCn1 a través de la kinasa ERK1/2. Es conocido que los Estrógenos (E) tienen efectos cardioprotectores a nivel cardíaco, pero poco se sabe que papel tienen en la regulación de los transportadores encargados de mantener la homeostasis dentro del miocito cardíaco.Objetivo: Evaluar la regulación de los trasportadores alcalinizantes cardíacos (NHE y NBC) por los E.Materiales y métodos: Se utilizaron miocitos ventriculares aislados de ratas hembras Wistar de 3 meses de edad cargadas con un indicador fluorescente sensible a H+ (BCECF 10 µM). Para evaluar la actividad del NHE o del NBC total se realizaron Pulsos de Amonio, durante los cuales se induce una acidificación intracelular y luego se estudia la velocidad de recuperación hasta el pHi basal. En el caso del NHE, los Pulsos se realizaron en solución extracelular Hepes (no tiene bicarbonato) y en el caso del NBC, se realizaron en solución extracelular de bicarbonato en presencia continua de HOE 642 10 µM (inhibidor del NHE). Para evaluar en forma selectiva al NBCe1 se realizan Pulsos de alto K+, durante los cuales se genera una despolarización del potencial de membrana que activa a la isoforma electrogénica en forma excluyente. Luego se analiza el aumento del pHi al final de la exposición al alto K+ como índice de actividad del NBce1. Resultados: La preincubación de los miocitos durante 10 minutos con E 10 nM mostró una tendencia a estimular la actividad del NHE (dpH/dt Control: 0,057±0,004, n=15 vs E: 0,064±0,002, n=3) y a inhibir la actividad del NBC, aunque hasta el momento no es estadísticamente significativa (dpH/dt Control: 0,038±0.008, n=7 vs E: 0.022±0.004, n=6). Con el objetivo de discernir la isoforma implicada en dicha inhibición, realizamos los Pulsos de alto K+, encontrando que la preincubación con E no tuvo efectos sobre la actividad del NBCe1 (Delta de pH Control: 0,085±0,013, n=6; vs E: 0,087±0,014, n=9). Estos resultados, aunque muy preliminares, demuestran que los E estimulan al NHE, mientras que inhiben exclusivamente a la isoforma electroneutra del NBC.Conclusiones: Estos resultados, parte de un proyecto más amplio, demuestran que los E son capaces de regular los trasportadores encargados de mantener el pHi, y con ello determinar, en parte, el funcionamiento cardíaco. Además estos resultados abren las puertas a la investigación de la vía intracelular a través de la cual los E generan dichos efectos y las implicancias que la alteración en dicha vía intracelular podría tener en las mujeres.