Inhibición del intercambiador Na+/H+ miocárdico (NHE1) por proteína kinasa G (PKG). Implicancias terapéuticas.

CAROLINA MASSARUTTI; ROMINA G. DÍAZ; HORACIO E. CINGOLANI; NÉSTOR G. PÉREZ

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXVII Congreso Nacional de Cardiología, Federación Argentina de Cardiología,; 2009

Recientemente sugerimos que el aumento de actividad de PKG inhibe al NHE1 luego de una acidosis sostenida. El objetivo de este trabajo fue estudiar con más detalle esta vía de señalización. Se hicieron experimentos en músculos papilares aislados de rata. Se midió la actividad del NHE1 mediante recuperación del pHi luego de una acidificación aguda por pre-pulso de amonio en ausencia de bicarbonato. Se aumentó PKG por inhibición de fosfodiesterasa-5A (PDE5A) con sildenafil (S, 1uM). El pHi basal (~7.20) y la máxima acidificación post-amonio (~6.75) fueron similares en los distintos grupos experimentales. Cuando la acidosis fue transitoria, S no alteró la recuperación del pHi [eflujo de H+ (JH+) en mmol/L/min: 1.01±0.13, n=5 control vs. 0.95±0.13, n=4 S]. Cuando la acidosis se sostuvo por 10 min, maniobra que por activación de las kinasas ERK1/2-p90RSK conduce a una fosforilación del NHE1 que lo activa aún más, se observó un significativo aumento del JH+ durante la recuperación del pHi en condición control (3.01±0.14 mmol/L/min, n=13, P<0.05) que fue drásticamente reducido por  S (0.40±0.15 mmol/L/min, n=4, P<0.05). La inhibición de la vía ERK1/2-p90RSK (10uM U0126) mimetizó el efecto de S (JH+: 0.62±0.13 mmol/L/min, n=3, P<0.05 vs. control), sugiriendo que S podría estar desfosforilando al NHE1. Para probar si S activa fosfatasas (PP1A y/o PP2A) para desfosforilar al NHE1 inhibimos PP2A de modo inespecífico (1nM ácido okadaico) y específicamente (100uM endothall) y en ambos casos el efecto de S fue cancelado (JH+: 2.95±0.16 mmol/L/min, n=4 y 3.00±0.16 mmol/L/min, n=4, respectivamente). En conclusión, los resultados muestran una inhibición del NHE1 por PKG que sólo se manifiesta luego de una acidosis sostenida y que se debería a la desfosforilación del NHE1 por activación de PP2A. Nuestro hallazgo permitiría explicar los efectos beneficiosos del incremento de la actividad de PKG en diferentes patologías miocárdicas caracterizadas por una exacerbada actividad del NHE1.