Evidencia de Interacción Física y Funcional de la Anhidrasa Carbónica IX con la isoforma electrogénica NBC1 del co-transportador Na+/HCO3- Cardíaco.

ORLOWSKI, A; DE GIUSTI, VC; ALVAREZ, BV; AIELLO, EA

Pucón, Chile

Congreso; XXIII Congreso de la Asociación Latinoamericana de Ciencias Fisiológicas.; 2009

Asociación Latinoamericana de Ciencias Fisiológicas.

Evidencia de interacción física y funcional de la anhidrasa carbónica con la isoforma electrogénica NBC1 del cotransportador Na+/HCO3-  cardíaco.   Evidence for the physical and functional interaction of the carbonic anhydrase with the cardiac isoform NBC1 of the Na+/HCO3- cotransport. Orlowski A, De Giusti VC, Álvarez BV, Aiello EA. Centro de Investigaciones  Cardiovasculares; Facultad de Ciencias Médicas de La Plata; UNLP; La Plata, Argentina.   El cotransportador Na+/HCO3- (NBC) juega un rol fundamental en la regulación del pH intracelular (pHi) cardíaco. Nosotros proponemos que la isoforma electrogénica del NBC denominada NBC1 forma un complejo físico/funcional con la anhidrasa carbónica (AC). En western blots (WB) de homogenato de corazón de rata (HCR) encontramos expresión de 4 isoformas de la AC (ACII, ACIV, ACIX y ACXIV) y del NBC1. ACII, ACIV, ACIX y ACXIV coinmunoprecipitaron con NBC1 en HCR, demostrando interacción física. La actividad del NBC1 se midió con epifluorescencia en miocitos ventriculares de rata, sometidos a una despolarización del potencial de membrana mediante la elevación del K+ extracelular (pulso de K+). Los datos se expresan como aumento de unidades de pHi a los 10 min del pulso de K+; * indica p<0.05. El pulso de K+ indujo un aumento del pHi de 0.14±0.04 (n=3) que fue anulado por un anticuerpo funcional contra el NBC1 (0.016±0.023, n=5*). La interacción funcional entre el NBC1 y la AC se estudió con los bloqueantes de la AC, etoxizolamida (ETZ) y benzolamida (BZ). El incremento de pHi control (0.165±0.017, n=11) fue inhibido por ETZ 100 mM (0.053±0.014, n=7*) y BZ 100 mM (0.090±0.025, n=6*). Estos resultados demuestran por primera vez la presencia en miocitos cardíacos de una interacción física y funcional del NBC con la AC, sugiriendo que ambas proteínas funcionan acopladas formando un metabolón.