CIC   05421
CENTRO DE INVESTIGACIONES CARDIOVASCULARES "DR. HORACIO EUGENIO CINGOLANI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Activación de la vía de la ERK1/2 y la CaMKII durante la acidosis intracelular en miocitos: Su rol en la modulación de la actividad del NHE-1
Autor/es:
LEZCANO NOELIA; VILA PETROFF, MARTÍN G; MATTIAZZI, ALICIA; MUNDIÑA-WEILENMANN CECILIA
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS).; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiología.
Resumen:
El NHE-1 es la principal isoforma del intercambiador Na+/H+ expresada en células miocárdicas. La activación del NHE-1 en respuesta a la acidosis intracelular, produce  un intercambio electroneutral de Na+ y H+ que tiende a la normalización del pH intracelular (pHi). Se ha propuesto que numerosas proteínas quinasas podrían fosforilar y estimular al NHE-1 (ERK1/2 y su sustrato p90rsk, p160rock, Nik, CaMKII). El rol de la ERK1/2 es el más estudiado y su participación en la acidosis sostenida es conocida. Previamente describimos que la acidosis hipercápnica activa a la CaMKII. Esta quinasa fosforila sustratos esenciales para la recuperación de la contractilidad miocárdica y contribuye a la recuperación del pHi vía activación del NHE-1. El objetivo de este trabajo fue estudiar la relación de la vía CaMKII con la vía de las ERK1/2 en la activación del NHE-1 durante la acidosis. Se midieron el pHi (SNARF1-AM) y la fosforilación de ERK1/2 (inmunoblot) en miocitos aislados de rata sometidos a acidosis intracelular sostenida (HS) generada por exposición a ClNH4 y lavado del mismo previo al pasaje por una solución libre de Na+ para inhibir el NHE-1. El protocolo se repitió en presencia de los inhibidores de ambas vías de fosforilación. La HS aumentó la fosforilación de las ERK1/2 (201,8±23,3% n=10 respecto del control). Este efecto fue abolido por el inhibidor de esta vía PD98059 (59.9±27.4% n=3) y no afectado por el inhibidor de la CaMKII, KN-93 (157,5±17,4% n=11). La velocidad de recuperación del pHi en la HS (0,22±0,02 min-1 a pH: 6,8 n= 6) fue significativamente menor en presencia de PD98059 (0,14±0,02 n=5) y de KN93 (0,14±0,01 n=5). La velocidad de recuperación del pHi se enlenteció aún más cuando los miocitos se preincubaron con ambos inhibidores simultáneamente (0,06±0,02 n= 3, p<0.05). Los resultados indican que tanto la vía de la ERK1/2 como la CaMKII activan al NHE-1 en forma independiente y que ambas vías son funcionales en la recuperación del pHi durante la HS.
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