El aumento del secuestro de calcio por el retículo sarcoplasmatico (RS) cardiaco previene las arritmias ventriculares por alteración del receptor de rianodina del RS

MAZZOCCHI G; SOMMESE L; FELICE J; DI CARLO MN; PALOMEQUE J; GONZALEZ P; BIBÉ S; FAINSTEIN D; LASCANO EC; NEGRONI JA; VALVERDE CA; MATTIAZZI A

La Plata

Congreso; II Congreso Internacional; 2015

Facultad de Ciencias Médicas, UNLP

Introducción: Ratones con pseudofosforilación constitutiva (S2814D)de los RyR2 o canales de Ca2+ del retículo sarcoplasmático cardiaco(RS), aumentan la probabilidad de apertura de los RyR2 y en consecuencia lapérdida de Ca2+ en diástole. Esta condición aumenta la propensión aarritmias frente a una situación de estrés. Aunque la liberación aumentada de Ca2+en diástole se asocia a arritmogénesis, el rol del aumento del secuestro de Ca2+por el RS es controversial. Hipótesis:El aumento del secuestro de Ca2+ por el RS es capaz de rescatar dela propensión a arritmias de los ratones S2814D. Métodos: Generamos ratones SDKO, por la cruza de ratonesdeficientes de fosfolamban (PLN), proteína que inhibe el secuestro de Ca2+por la bomba de Ca2+ del RS, SERCA2a, (PLNKO) y ratones con pseudofosforilaciónconstitutiva de RyR2 en el residuo dependiente de CaMKII, con aumento de lapérdida de Ca2+ diastólica y realizamos experimentos in vivo y ex vivo en el corazón intacto y en miocitos aislados. Resultados: A nivel funcional, losmiocitos SDKO combinan el aumento del secuestro de Ca2+ de los PLNKOcon la disminución de la carga de Ca2+ del RS, por pérdida de Ca2+del mismo, de los S2814D. En reposo, los ratones S2814D y SDKO no presentaronarritmias. Sin embargo cuando fueron desafiados con un estrés catecolaminérgicopor infusión de cafeína y epinefrina, invivo o por estimulación eléctrica programada y alto Ca2+extracellular,ex vivo (corazón perfundido de Langendorff),los ratones S2814D desarrollaron arritmias ventriculares (complejosventriculares prematuros y taquicardia ventricular bidireccional), que disminuyeronsignificativamente por ablación de PLN en los ratones SDKO. A nivel de losmiocitos, la ablación de PLN convirtió las ondas de Ca2+arritmogénicas provocadas por alto Ca2+ en eventos no propagados ominiondas, vistas con microscopía confocal. Un modelo matemático de miocitohumano replicó estos resultados y permitió predecir el aumento de secuestro de Ca2+necesario para prevenir diferentes grados de pérdida de Ca2+diastólica. Conclusiones: Nuestrosresultados demuestran que el aumento en la retoma de Ca2+ del RS porla ablación de la PLN fue capaz de prevenir los eventos de arritmias disparadospor la pérdida de Ca2+ del RS por la pseudo fosforilación del RyR2 dependientede la CAMKII, al abortar la propagación de ondas de Ca2+, resaltandolos beneficios del incremento de la actividad de la SERCA2a en el RS en lasarritmias disparadas por Ca2+. El modelo matemático indica que losefectos beneficiosos del aumento en la retoma de Ca2+ del RS sondependientes de un balance entre la retoma de Ca2+ del RS y los mecanismosde liberación del mismo.