Una mutación que previene la fosforilación por PKA en el receptor de rianodina cardiaco (RyR2) incrementa el potencial arritmogénico de los RyR2 que presentan una mutación canónica para CPVT

PALOMEQUE J; HERNANDEZ JJ; ALVARADO FJ; RAMOS MONDRAGÓN R; CHEN X; BRADLEY DJ; VALDIVIA HH

Mar del Plata

Congreso; Congreso SAFIS; 2015

SAFIS

Es confuso el efecto de la fosforilación por PKA sobre el fenotipo disfuncional de receptores de rianodina cardiacos (RyR2) mutantes en la Taquicardia Ventricular Polimórfica Catecolaminérgica (CPVT). Para develarlo estudiamos una familia de miembros heterocigotos para 1) una mutación canónica CPVT (Y4721C), 2) una mutación insensible a PKA (R2027H), o 3) ambas. Examinamos la historia clínica familiar. Y4721C y R2027H fueron generados por mutagénesis específica. Ratones knock-in RyR2-S2030A, RyR2-R4496C o combinados fueron estudiados a nivel electrocardiográfico y celular. Se realizaron ensayos de unión de [3H]rianodina y Western Blots (WB). El padre acarrea Y4721C, tuvo un síncope por esfuerzo de adolescente, comenzó con fibrilación auricular (FA) a los 40 años y presenta miocardiopatía dilatada. La madre, asintomática, porta R2027H. Dos de los hijos con ambas mutaciones tienen un fenotipo severo, con recurrentes resucitaciones. Las generaciones subsecuentes, asintomáticas, tienen las mutaciones aisladas. Los WB mostraron fosforilación por PKA del WT y del Y4721C, pero no del R2027H. La activación dependiente de Ca2+ de R2027H y WT fueron similares (EC50=618144 y 72856nM) y menor en Y4721C (43456nM); sin embargo, la co-expresión de ambas mutaciones produjo un desplazamiento mayor en la curva de afinidad por Ca2+ (25025nM, p0.05, n=6). El electrocardiograma intracardiaco mostró una mayor incidencia de FA en los ratones con ambas mutaciones que en el resto. Las liberaciones de Ca2+ espontáneas de los miocitos fueron para los WT: 0.04±0.02; los R4496C: 0.04±0.02; los S2030A: 0.15±0.06; y para los R4496C-S2030A: 0.31±0.03 (p