La Angiotensina II promueve la muerte celular en miocitos aislados de rata por un mecanismo Ca2+-independiente que requiere un aumento de radicales libres, activacion de CaMKII y p38 MAPK

SAPIA LUCIANA; VALVERDE CARLOS; GONANO LUIS; MATTIAZZI, ALICIA; VILA PETROFF, MARTÍN G

Facultad de Cs. Médicas, UNLP

Jornada; Jornada de Medicna 2007, La Plata; 2007

Facultad de Cs. Médicas, UNLP

En la progresión hacia  la insuficiencia cardíaca (IC) la muerte celular ha sido propuesta como una de las las principales responsables de este fenómeno debido a una disminución de unidades contráctiles.  La Ang II promueve la muerte celular y en la IC los niveles de Ang II se encuentran aumentados. Aunque el  aumento de Ca2+i ha sido sugerido como el principal efector de muerte celular inducida por el péptido, la Ang II activa otros mensajeros alternativos, independientes del Ca2+ que podrían potencialmente ser inductores de apoptosis/necrosis. Los radicales libres (ROS), la p38 MAPK y la CaMKII han sido identificados como moléculas inductoras de muerte celular. En este estudio, utilizando miocitos de rata cultivados durante 24 hs, evaluamos si la muerte celular inducida por Ang II se asocia con un aumento del Ca2+i y/o de radicales libres y sí esta depende de la activación de CaMKII y p38 MAPK. La incubación de las células con 1 µM de Ang II disminuyó significativamente la viabilidad celular determinada morfometricamente, de 69.9 ± 3.2 a 40.8 ± 4.3 (n=6), a expensas de un aumento de la apoptosis evaluada por la activación de caspasa 3 y tinción TUNEL y necrosis determinada por liberación del LDH. El tratamiento con Ang II no modificó el Ca2+i (fluorescencia de Indo-1) pero aumento significativamente la producción de ROS (fluorescencia de DFC-DA) y el tratamiento con el secuestrador de ROS, MPG, previno completamente la muerte celular inducida por el péptido. En experimentos paralelos, la muerte celular inducida por Ang II se previno con los inhibidores de la CaMKII, Kn-93 (71 ± 4.6; n=4 ) y de la p38 MAPK, SB 203580 (62.2 ± 2; n=6) y la sobreexpresión de la p38 MAPK, mediante transferencia génica adenoviral, exacerbó la muerte celular inducida por el péptido ( 25.6 ± 0.9 n=3). Estos resultados sugieren que la muerte celular inducida por la Ang II no esta mediada por un aumento del Ca2+i y establece a los radicales libres como un mecanismo activador de la CaMKII y de la p38 MAPK y que culmina en la muerte celular.