La Angiotensina II promueve la muerte celular en miocitos aislados de rata por un mecanismo Ca+2i independiente que requiere un aumento de radicales libres, activación de CaMKII y p38 MAPK

LUCIANA SAPIA; CARLOS VALVERDE; VILA PETROFF, MARTÍN G

Mar del Plata Argentina

Congreso; LV Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología.; 2007

Sociedad Argentina de Fisiología

La muerte celular contribuye a la progresión de la insuficiencia cardiaca (IC). El aumento de la Ang II circulante ha sido propuesto como uno de los principales determinantes de la evolución de la IC en parte debido que promueve la muerte celular. Aunque un aumento de Ca2+i ha sido sugerido como el principal efector de muerte celular inducida por el péptido, la Ang II activa otros mensajeros alternativos, independientes del Ca2+ que podrían potencialmente ser inductores de apoptosis/necrosis. Entre ellos, los radicales libres (ROS), la p38 MAPK y la CaMKII han sido identificados como moléculas inductoras de muerte celular. En este estudio, utilizando miocitos de rata cultivados durante 24 hs, evaluamos sí la muerte celular inducida por Ang II se asocia con un aumento del Ca2+i y/o de radicales libres y sí esta depende de la activación de CaMKII y p38 MAPK. La incubación de las células con 1 µM de Ang II disminuyó significativamente la viabilidad celular determinada morfometricamente, de 69.9 ± 3.2 a 40.8 ± 4.3 (n=6), a expensas de un aumento de la apoptosis evaluada por la activación de caspasa 3 y tinción TUNEL y necrosis determinada por liberación del LDH. El tratamiento con Ang II no modificó el Ca2+i (fluorescencia de Indo-1) pero aumento significativamente la producción de ROS (fluorescencia de DFC-DA) y el tratamiento con el secuestrador de ROS, MPG, previno completamente la muerte celular inducida por el péptido. En experimentos paralelos, la muerte celular inducida por Ang II se previno con los inhibidores de la CaMKII, Kn-93 (71 ± 4.6; n=4 ) y de la p38 MAPK, SB 203580 (62.2 ± 2; n=6) y la sobreexpresión de la p38 MAPK, mediante transferencia génica adenoviral, exacerbó la muerte celular inducida por el péptido ( 25.6 ± 0.9 n=3). Estos resultados sugieren que la muerte celular inducida por la Ang II no es mediada por un aumentos de Ca2+i y establece a los radicales libres como un mecanismo activador de la CaMKII y de la p38 MAPK y que culmina en la muerte celular.