CIC   05421
CENTRO DE INVESTIGACIONES CARDIOVASCULARES "DR. HORACIO EUGENIO CINGOLANI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
La Angiotensina II promueve la muerte celular en miocitos aislados a través de la activación de la Ca2+ -calmodulina-kinasa II (CaMKII). Rol del Ca2+, los radicales libres y la p38 MAPK
Autor/es:
PALOMEQUE J; SAPIA, L; VALVERDE CA;; VELEZ RUEDA J.O; GONANO L.;; SALAS, M; MATTIAZZI A; VILA-PETROFF, M.
Lugar:
Facultad de Medicina de la Universidad de Buenos Aires
Reunión:
Jornada; III Jornada de Investigación de la SCBA, I Jornada de Investigación Básica de la FAC; 2007
Institución organizadora:
Federación Argentina de Cardiología
Resumen:
La Angiotensina II (Ang II) modula positivamente la contractilidad en el corazón de gato, por aumento del Ca2+ intracelular (Vila-Petroff, 2000) y negativamente en el de rata. Este último efecto es independiente de cambios en el Ca2+ intracelular y se asocia a una mayor  actividad de la p38 MAPK (Palomeque, 2006). Por otro lado, en ambas especies  la CaMKII ha sido vinculada con la regulación de la homeostasis del Ca2+ y con la muerte celular, contribuyendo a la pérdida de las unidades contráctiles en el corazón (Brown JH, Vila-Petroff 2007). En la Insuficiencia cardíaca (IC) tanto los niveles de Ang II como la actividad de CaMKII se encuentran elevados, siendo el aumento de la Ang II circulante uno de los principales determinantes de la evolución de la IC, en parte por promover la muerte celular. El presente trabajo se propone establecer el nexo entre la Ang II y la CaMKII en la cascada de señales que conduce a la muerte celular y dilucidar los mecanismos subcelulares que vinculan a ambas  moléculas en dos especies en las que la Ang II posee efectos opuestos sobre la contractilidad. Se realizaron cultivos por 24h de miocitos aislados de gato y rata adultos y quiescentes en los que se evaluó la posible vinculación de la CaMKII, los radicales libres (ROS) y la p38 MAPK con la muerte celular producida por Ang II. Los resultados indicaron que 1 µM Ang II disminuyó significativamente la viabilidad celular en aproximadamente un 30 % en ambas especies, a expensas de un aumento de la apoptosis  (TUNEL y disminución de la relación entre la proteína proapoptótica Bax y la antiapoptótica Bcl2) y necrosis (aumento de LDH). El efecto de la Ang II se asoció con un aumento de la actividad de la CaMKII (inmunofluorescencia e inmunoblot) y de la fosforilación de P-Thr17 de fosfolamban, clásico sustrato de la CaMKII. El tratamiento con Ang II no modificó el Ca2+i pero aumentó significativamente la producción de ROS (ambos medidos por fluorescencia). En experimentos paralelos, los inhibidores de la CaMKII, (KN-93), de ROS (MPG)  y de la p38 MAPK (SB 203580) y la sobreexpresión de esta última (transferencia génica por adenovirus)  previnieron y exacerbaron, respectivamente, la muerte celular inducida por Ang II.  Estos resultados sugieren que la muerte celular inducida por la Ang II no sería mediada por aumentos globales del Ca2+. En cambio, el aumento de ROS, la activación de CaMKII y de la p38 MAPK serían eventos esenciales para las cascada apoptótica inducida por el péptido. Un hecho muy interesante y atractivo,  que surge de los presentes resultados, es que la activación de la CaMKII en presencia de Ang II ocurriría a través de una vía   alternativa, independiente del Ca2+. Dado que previamente se demostró  que cambios en el estado de oxidación modularían la actividad de la CaMKII (Howe, 2004), especulamos que el aumento de ROS inducido por la Ang II podría ser el mecanismo activador de la CaMKII que a su vez active a la p38 MAPK y  culmine en la muerte celular.
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