El GPR30 emerge como un nuevo receptor de membrana que media los efectos no-genómicos de aldosterona en corazón

DE GIUSTI VC; ORLOWSKI A; CIANCIO MC; LUIS GONANO; MARTÍN VILA PETROFF; AIELLO EA

La Plata

Congreso; I Congreso Internacional de la Facultad de Ciencias Médicas de la UNLP; 2013

El cotransportador Na+/HCO3- cardíaco (NBC) es, junto al intercambiador Na+/H+ (NHE), uno de los principales mecanismos alcalinizantes de los miocitos. En corazón, Aldosterona (Aldo) aumenta la producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) y activa al NHE por mecanismos no-genómicos mediados por el receptor de mineralocorticoide (MR). Recientemente, el receptor de membrana acoplado a proteína G (GPR30) emergió como el mediador de ciertos efectos rápidos de Aldo en músculo liso vascular. Hasta el presente no se han reportado efectos de Aldo sobre el NBC, siendo el objetivo del presente trabajo investigar dicho efecto. Para calcular la actividad del NBC se utilizaron miocitos ventriculares aislados de ratas Wistar y se realizaron dobles pulsos de amonio (el primer pulso es el control del segundo) en un medio extracelular con bicarbonato y el inhibidor del NHE (HOE 642 10µM). Los datos se expresan como porcentaje de influjo de HCO3- y * indica p < 0.05 vs control. Aldo 10 nM aumentó la actividad del NBC 44±11 %* (n=5), efecto prevenido con Eplerenona (1 µM, bloqueante del MR; 14±9 %, n=4), pero no con Cicloheximida (10 µM, inhibidor de la síntesis proteica; 36%±3 %*, n=4), demostrando que es un efecto rápido y no-genómico. Adicionalmente, el efecto de Aldo fue prevenido tanto con Apocinina (300 µM, inhibidor de la NADPH oxidasa; 8±12 %, n=4;) como con MPG (2 mM, secuestrador de ROS; -0.2±12 %, n=4), implicando a los ROS en la activación del NBC por Aldo. Sorprendentemente, la activación del NBC por Aldo también fue prevenida preincubando a los miocitos con G15, un bloqueante selectivo del GPR30 (1 µM; -8.5±3 %, n=5), sugiriendo la participación de tal receptor en el efecto de Aldo sobre el NBC. Consistentemente, la presencia de G1 (agonista del GPR30) activó al NBC (1 µM, 85±17 %*, n=7), efecto que, de forma similar a lo ocurrido para Aldo, fue prevenido con G15 (18±10 %, n=5), Eplerenona (34±9 %, n=6), cicloheximida (-17±27 %, n=6), MPG (-29±9 %, n=7) y Apo (-16.2±8 %, n=7). En experimentos paralelos, G1 aumentó la producción de ROS en miocitos aislados, efecto prevenido en presencia de G15 (control: 0.9±0.2; n=8; G1:1.91±0.47; n=11*; G1+G15: 0.63±0.2; n=6). Nuestros resultados demuestran por primera vez que Aldo, por medio de la activación del receptor GPR30, estimula al NBC a través de un mecanismo rápido y no-genómico, que implica la producción de ROS. Pensamos que la participación del GPR30 en la vía de señalización de Aldo abre nuevos caminos en la investigación de los efectos de la hormona en el corazón.