La fosforilación del canal de rianodina (RyR2) por la quinasa dependiente de Ca2+ y calmodulina (CaMKII) es determinante del daño miocárdico irreversible por isquemia y reperfusion (I/R)

DI CARLO MN; SAID M; VALVERDE CA; MATTIAZZI A; SALAS M

La Plata

Congreso; "I Congreso Internacional", Facultad de Ciencias Médicas, UNLP; 2013

Facultad de Ciencias Médicas, UNLP

En el corazón sometido a un prolongado período de isquemia y posterior reperfusión (I/R) los miocitos afectados mueren por necrosis y apoptosis. La CaMKII se activa al inicio de la reperfusión y su inhibición reduce el daño celular. Experimentos previos revelaron que el retículo sarcoplasmático (RS) está involucrado en la vía deletérea. Objetivo: determinar cuál de los sitios del RS fosforilables por CaMKII (treonina 17 de fosfolamban (PLN) o serina 2814 del receptor de rianodina (RyR2) participan de la injuria irreversible por I/R. Se realizaron experimentos en ratones controles C57BL/6, ratones transgénicos (TG) con los sitios fosforilables por CaMKII en PLN y RyR2, sustituidos por alanina. i.e. no fosforilables (ratones DM y S2814A respectivamente), y ratones TG con el sitio S2814 sustituido por aspartato i.e. mimetizando una fosforilación constitutiva (ratones S2814D). Los corazones aislados y perfundidos se sometieron a I/R global normotérmica (45/120min). Se determinaron parámetros mecánicos, tamaño de infarto (TTC), actividad de LDH en el efluente de reperfusión (espectrofotometría) y apoptosis por medio de la técnica de TUNEL y del cociente entre proteínas pro y antiapoptóticas (Bax/Bcl-2).