Impacto de la fosforilacion del canal liberador de ca2+ receptor de rianodina (ryr2) del reticulo sarcoplasmatico (rs ) por la quinasa dependiente de ca2+ y calmodulina (camkii) en la injuria irreversible por isquemia y reperfusion (I/R).

DI CARLO MN; SAID M; VALVERDE CA; WEHRENS XH; MATTIAZZI A; SALAS M

Rosario

Congreso; XXXI Congreso Nacional de Cardiología; 2013

Federación Argentina de Cardiología

En experimentos previos demostramos que CaMKII se activa en el miocardio al comienzo de la reperfusión y que su inhibición, produce una disminución significativa del tamaño del infarto, necrosis y apoptosis (Salas el al., 2010). Uno de los sustratos de CaMKII, es el residuo serina (Ser) 2814 del RyR2. Nuestro objetivo fue evaluar si la fosforilación de dicho sitio participaba en la injuria por I/R. Se realizaron experimentos en ratones C57BL/6, en transgénicos con el residuo fosforilable por CaMKII del RyR2 mutado a alanina (no fosforilable - Ser2814A-) o a aspartato (fosforilación constitutiva -Ser2814D-) y en sus controles (WT). Corazones aislados y perfundidos (Langendorff) se sometieron a I/R global normotérmica (45min/120min). Se obtuvieron parámetros mecánicos y se midió tamaño de infarto (trifeniltetrazolio). Los C57BL/6 mostraron un aumento significativo de la fosforilación del sitio Ser2814 del RyR2 a los 3 y 5 min de reperfusión (210.3±41.9% y 191.1±41.0% de los valores preisquémicos, respectivamente). Los Ser2814A presentaron una disminución significativa del área de infarto (16.40±1.60% Ser2814A vs 32.31±4.96 % WT, n =6 / grupo) y mayor recuperación contráctil a los 120min de reperfusión (8.37±2.31 Ser2814A vs 2.45 ±.0.66 WT, n=7/grupo). Los Ser 2814D mostraron igual recuperación contráctil que los WT y un mayor tamaño de infarto, que no alcanzó niveles significativos. Este resultado podría explicarse porque los Ser2814D presentan un menor contenido de Ca2+ del RS (van Oort et al. Circulation, 2010). Para verificar esta hipótesis, cruzamos ratones Ser 2814D con animales cuyo RS está sobrecargado de calcio debido a que carecen de fosfolamban (KO), con el objeto de obtener un animal con RS cargado de calcio y RyR2 constitutivamente fosforilado (ratones SK). Los corazones de estos animales presentaron un aumento significativo del tamaño del infarto y de la necrosis (LDH) y disminución de la recuperación contráctil. Conclusión: la fosforilación del RyR2 por CaMKII y la carga de Ca2+ del RS están involucrados en el daño miocárdico producido por I/R.