Rol predominante de la P-GSK-3β, citosólica en la cardioprotección mediada por el pre y postacondicionamiento isquémico en SHR

LF GONZÁLES ARBELAEZ; IA PÉREZ NÚÑEZ; FANTINELLI JC; SM MOSCA

Rosario

Congreso; XLIII, Reunión Científica Anual 2012 Sociedad Argentina de Fisiologia (SAFIS); 2012

Resumen #24: Rol predominante de la P-GSK-3β citosólica en la cardioprotección mediada por el pre y postacondicionamiento isquémicos en SHR.   González Arbeláez LF, Pérez Núñez A, Fantinelli JC, Mosca SM. Centro de Investigaciones Cardiovasculares. Facultad de Ciencias Médicas, Universidad Nacional de La Plata. 60 y 120 La Plata (Bs As). E-mail: luisafgarbelaez@hotmail.com   Estudios previos en animales normotensos muestran que la acción cardioprotectora del pre (PRE) y postacondicionamiento isquémicos (POS) son mediadas por la fosforilación en Ser 9 de la enzima glucógeno sintasa cinasa (P-GSK-3β). Nuestro objetivo fue determinar si P-GSK- 3β así como su ubicación (citosólica y/ó mitocondrial) es responsable de los efectos observados por la aplicación del PRE y POS en ratas hipertensas espontáneas (SHR). Para ello corazones aislados de SHR de 5 meses de edad y perfundidos por el sistema de Langendorff fueron asignados a los siguientes grupos:1) Control isquémico (CI): 45 min de isquemia global (IG) y 1 hora de reperfusión (R); 2) PRE: se aplicó un ciclo de 5 min de IG y 10 min de R previo a la IG de 45 min; 3) POS: se aplicaron 3 ciclos de 30 seg de IG y 30 seg de R al inicio de la R; 4) y 5) Se administró durante 10 min previos a la IG ó 3 min al inicio de R un inhibidor no selectivo (ClLipre y ClLipos) ó selectivo de GSK- 3β [indirubina-3’-monoxime,5-yodo, IMIpre e IMIpos]. Al final de R se determinó el tamaño del infarto por la tinción con sales de tetrazolio, el contenido de P-GSK-3β en las fracciones citosólica y mitocondrial del tejido cardíaco por western blot y la interacción física P-GSK-3β/ VDAC (proteína mitocondrial) por coinmunoprecipitación. El tamaño del infarto fue de 51 ± 4 % en CI y disminuyó significativamente con todas las intervenciones (PRE: 34 ± 1%; POS: 36 ± 4 %; ClLipre: 36 ± 2%; ClLipost: 35 ± 4%; IMIpre: 33 ± 1%; IMIpos: 36 ± 2%). La expresión de P-GSK-3β citosólica disminuyó en CI (35 ± 1%) y aumentó significativamente con respecto a CI en todas las intervenciones (PI: 85 ± 1%; PCI: 83 ± 3%; ClLipre: 81 ± 2%; ClLipost: 84 ± 3%; IMI pre: 81 ± 1%; IMIpost: 82 ± 1%) mientras que la mitocondrial experimentó cambios opuestos, aumentando en CI (165 ± 3%) y disminuyendo frente a las intervenciones (PI: 48 ± 1%; PCI: 44 ± 1%; ClLipre: 73 ± 4%; ClLipost: 71 ± 3%; IMI pre: 73 ± 1%; IMIpost: 73 ± 3%). El nivel de interacción física P-GSK-3β citosólica/VDAC disminuyó en CI y aumentó con respecto a CI en todas las intervenciones. Estos resultados muestran que, en las SHR, la P-GSK-3β citosólica y su interacción física con VDAC son responsables de la disminución del tamaño del infarto producido por el PRE y POS, efecto probablemente asociado a una disminución de la permeabilidad mitocondrial.