CIC   05421
CENTRO DE INVESTIGACIONES CARDIOVASCULARES "DR. HORACIO EUGENIO CINGOLANI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto de los cambios redox del receptor de rianodina cardíaco (RyR2) sobre la generación de arritmias de reperfusión
Autor/es:
SAID M; BECERRA R; HERRERO A; MUNDIÑA-WEILENMANN C; MATTIAZZI A; VITTONE L
Lugar:
Rosario, Santa Fé
Reunión:
Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiología
Resumen:
Numerosas evidencias clínicas y experimentales ponen de manifiesto la acción deletérea que tienen las arritmias cardíacas que aparecen durante la reperfusión (R) luego de una isquemia (I). En trabajos previos demostramos que en la R temprana, momento en el que aparece el mayor número de arritmias, se activa la proteína quinasa dependiente de Ca2+ y calmodulina (CaMKII) y aumenta la fosforilación del residuo Ser2815 del canal liberador de Ca2+ o receptor de rianodina (RyR2) del retículo sarcoplasmático cardíaco (RS) (Said y col. JMCC 51, 2011). Se ha demostrado que la fosforilación del RyR2 en este residuo promueve la pérdida de Ca2+ desde el RS en diástole y que esta pérdida es arritmogénica. El RyR2 además de ser fosforilado es sensible a cambios redox del entorno, y como se ha descripto que existe un aumento de la generación de especies reactivas del O2 y del N2 durante R, el objetivo de nuestro trabajo fue evaluar si en R ocurren modificaciones redox del RyR2 y en ese caso, si están asociadas a la aparición de arritmias. Se realizaron experimentos en corazones de rata perfundidos (técnica de Langendorff), que fueron sometidos a isquemia global, seguida de reperfusión (20/3min) a 37ºC. La medición de los potenciales de acción monofásicos epicárdicos y de la presión desarrollada por el ventrículo izquierdo permitió cuantificar la aparición de latidos prematuros (LP) durante los 3 primeros minutos de R frente a las distintas intervenciones. Los experimentos se realizaron en presencia y ausencia de inhibidores de la NADPH oxidasa (Apocinina 100mM, APO), de la óxido nítrico sintasa (L-NAME 10mM) y de la CaMKII (KN-93 2,5mM). A distintos tiempos durante el protocolo, los corazones fueron congelados y se realizó la inmunodetección de los cambios redox y de fosforilación del RyR2. Los resultados muestran un aumento significativo de la fosforilación del RyR2 en el sitio Ser2815 a R1min, que pudo ser prevenido por el inhibidor específico de la quinasa, KN-93 (228.5±40.7% vs 97.2±11.1% n=5). KN-93 también disminuyó el número de LP de 42 ±4 en R3min a 13±3 en R3min+KN-93. La S-nitrosilación del RyR2 aumentó de 1±0.14 U.A. (Preisquemia) a 3.34±0.72 (R1min, n=7) y la S-glutationilación de 0.9±0.1 (Preisquemia) a 2.1±0.4 U.A R1min (n=10), (p<0.05 en ambos casos). El tratamiento de los corazones con APO disminuyó los niveles de S-glutationilación (de 2.1±0.4 a 0.9±0.2 p<0.05) e indujo un aumento del número de LP hasta 59±3 en R1min+APO (p<0.05), en cambio el tratamiento con L-NAME no modificó la aparición de LP. Los resultados sugieren que el aumento de la S-glutationilación del RyR2 al inicio de la R, contrarresta el efecto arritmogénico inducido por la fosforilación del RyR2 en Ser2815. Quedaría por establecer si la S-glutationilación funciona como un mecanismo protector limitando la pérdida de espontánea de Ca2+ desde el RyR2. PIP 0463  
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