CIC   05421
CENTRO DE INVESTIGACIONES CARDIOVASCULARES "DR. HORACIO EUGENIO CINGOLANI"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
IDENTIFICACION DE LA ISOFORMA 1 DEL INTERCAMBIADOR Na+/H+ (NHE1) EN MITOCONDRIAS: UN NUEVO BLANCO PARA LA PROTECCION DEL DAÑO ISQUEMICO CARDIACO.
Autor/es:
MORGAN, PE; VILLA-ABRILLE, MC; CINGOLANI, E; CINGOLANI, HE; ALVAREZ, BV
Lugar:
Sheraton Hotel
Reunión:
Congreso; XVII Congreso Argentino de Hipertensión Arterial; 2010
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Hipertension Arterial
Resumen:
<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:SimSun; panose-1:2 1 6 0 3 1 1 1 1 1; mso-font-alt:宋体; mso-font-charset:134; mso-generic-font-family:auto; mso-font-format:other; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:1 135135232 16 0 262144 0;} @font-face {font-family:"@SimSun"; panose-1:0 0 0 0 0 0 0 0 0 0; mso-font-charset:134; mso-generic-font-family:auto; mso-font-format:other; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:1 135135232 16 0 262144 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:SimSun; mso-fareast-language:ZH-CN;} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.85pt 3.0cm 70.85pt 3.0cm; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Hasta el momento han sido descriptas diez isoformas del intercambiador Na+/H+ (NHE1-NHE10), las cuales difieren en sus estructuras, distribución, localización, y sensibilidad ante diferentes estímulos.  La inhibición de la isoforma 1 del NHE reduce los daños producido por isquemia/reperfusión (I/R), hipertrofia e insuficiencia cardíaca.  Si bien entre los mecanismos que subyacen al efecto protector mediado por bloqueo del NHE1 involucran el mantenimiento del potencial de membrana mitocondrial, el enlentecimiento de la apertura del poro de transición mitocondrial, y la reducción de la producción de ión superoxido por la mitocondria, la posibilidad de que estos efectos protectores sean mediados por el NHE1 presente en la mitocondria no ha sido estudiada con detalle.  Por este motivo, estudiamos la expresión del NHE1, una proteína típica de sarcolema, en mitocondrias aisladas de corazones de rata.  Utilizando anticuerpos específicos de la isoforma 1 del NHE, se pudo detectar la expresión del NHE1 mediante immunoprecipitación seguida de análisis por immunoblots (Western Blot, WB), y también en lisados de mitocondrias aisladas de ventrículos izquierdo de corazones de rata, mediante WB.  Una secuencia de RNA capaz de reducir específicamente la expresión del NHE1 (shNHE1), fue incorporada en un vector (lentivirus, LV) e inyectada en el miocardio de corazones de rata.   Como controles fueron inyectadas ratas con solución salina.  Luego de dos semanas, las ratas fueron sacrificadas, y la expresión del NHE1 examinada en lisados mitocondriales de ventrículos, mediante WB.  La inyección del LV-shNHE1 redujo la expresión del NHE1 en un 69 ± 1% comparado con control (n= 4, P<0.02), confirmando la expresión del NHE1 en mitocondrias.  La expresión del NHE1 fue confirmada por microscopia electrónica, mediante la técnica de immunogold.  La localización de las partículas de oro, mostraron la asociación del NHE1 con la membrana interna de la mitocondria.  Finalmente, immunocitoquímica combinada con microscopía confocal en miocitos aislados de ventrículos de rata, mostraron la localización del NHE1 en discos intercalares, núcleo y túbulos T; y co-localización del NHE1 con la proteína citocromo C oxidasa del Complejo 1 (COX1), un marcador específico de mitocondrias. Podemos concluír entonces que hemos demostrado por primera vez la expresión de la isoforma 1 del intercambiador Na+/H+ en mitocondrias.  Por lo tanto el NHE1 localizado en la mitocondria podría representar un nuevo blanco para proteger al corazón del daño producido por I/R.
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