El silenciamiento del intercambiador Na+/H+ miocárdico (NHE-1) cancela la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento

NÉSTOR G. PÉREZ; MIRIAN C ROLDÁN; IRENE L. ENNIS; MARIELA B. NOLLY; MARÍA C. VILLA-ABRILLE; EUGENIO CINGOLANI; BERNARDO V. ÁLVAREZ; HORACIO E. CINGOLANI

Córdoba

Congreso; XXIX Congreso Nacional de Cardiología; 2011

Federación Argentina de Cardiología

El estiramiento miocárdico provoca un aumento rápido de fuerza seguido por una fase lenta o SFF. La SFF se debe a un aumento del Ca2+ intracelular cuyo origen se discute. Nosotros hemos propuesto que la activación del NHE-1 es clave para la SFF, pero resultados de otros grupos desafían este concepto. El objetivo de este trabajo fue testear específicamente el rol del NHE-1 en la SFF. Para ello diseñamos un RNA de interferencia capaz de silenciar específicamente al NHE-1 y lo incorporamos a un vector lentiviral (l-shNHE1), el que fue luego inyectado en la pared ventricular izquierda de ratas Wistar. Otro grupo de ratas inyectadas con un vector que expresaba una secuencia no-silenciadora (scramble) del NHE-1 sirvió de control. Luego de 1 mes se midió la expresión del NHE-1 en el ventrículo izquierdo y se evaluó la actividad del NHE-1 mediante la recuperación del pHi luego de una carga ácida (prepulso de ammonio) en músculos papilares aislados, en los que también se midió la SFF. Mediante microscopía confocal se confirmó la presencia del lentivirus en el miocardio ventricular izquierdo en sitios lejanos al de inyección. El l-shNHE1 redujo la expresión del NHE-1 (45±8 % del control, P<0.05). Esto correlacionó con un enlentecimiento de la recuperación del pHi luego de la acidosis [maxdpHi/dt 0.055±0.008 (scramble) vs. 0.009±0.004 (l-shNHE1) unidades de pH/min, P<0.05], un corrimiento hacia la izquierda de la relación entre JH+ (eflujo de H+ corregido por la capacidad buffer intrínseca) y pHi, y la cancelación de la SFF [124±2 vs. 101±2 % de la fase inicial, P<0.05]. Esto último ocurrió  a pesar de que la fosforilación de las kinasas ERK1/2, activadoras del NHE-1, se mantuvo elevada [247±12 (estiramiento) y 263±23 (estiramiento l-shNHE1) % del control, P<0.05 vs. control no estirado]. Dado que los mecanismos generadores de la SFF son similares a los de la hipertrofia cardíaca podemos especular que esta técnica podría utilizarse para la prevención de esta patología