Triatoma virus en insectarios: cuarentena y metodología para su detección

BALSALOBRE A; PAZOS R; SUSEVICH M. L; RABINOVICH J. E; ECHEVERRÍA M. G; MARTI G. A

Posadas

Congreso; IX Congreso Argentino de Entomología; 2015

Centro de Investigaciones Entomológicas - Parque Tecnológico Misiones (CIE-PTMi)

Triatoma virus (TrV) es el único virus entomopatógeno en triatominos identificado hasta el momento. La propagación de TrV en insectarios depende de los procedimientos de manejo y dinámica de las poblaciones de triatominos. Los efectos de la propagación pueden ser devastadores y, a menudo, colonias enteras deben ser sacrificados para evitar la propagación del virus en todo el insectario. Los objetivos de este trabajo fueron determinar el tiempo desde la ingesta hasta la excreción de TrV y estimar su tasa de transmisión horizontal, con el fin de establecer la cuarentena necesaria para evitar el ingreso de insectos infectados con TrV al insectario. Para determinar el tiempo desde la ingesta hasta la excreción de TrV, se utilizaron 20 ninfas 5to de T. infestans, las cuales se pesaron y se alimentaron de forma individual durante 1 hora utilizando un alimentador artificial con sangre humana cedida por el ?Instituto de Hemoterapia? de la ciudad de La Plata, Argentina. A la sangre se le añadió una solución de proteínas virales de 0,2 mg/ml. Luego de dos horas se volvió a pesar los insectos para calcular el aumento de peso de cada individuo, y así estimar la cantidad de proteínas virales ingeridas por cada insecto. Cada insecto se colocó en recipientes individuales, y se los alimento durante 30 minutos cada 15 días usando el mismo alimentador artificial, pero con sangre no infectada con TrV. Diariamente se retiraron las heces excretadas naturalmente por los insectos para la detección de TrV mediante RT-PCR. Los análisis estadísticos (correlaciones lineales y análisis de covarianza) se llevaron a cabo utilizando el software Statistica. Para estimar la tasa de transmisión horizontal de TrV, se colocaron 10 adultos libre de TrV y se agregó un macho y una hembra infestados con TrV. Después de 25 días, las heces de cada individuo fueron recogidos mediante compresión abdominal, y este procedimiento se repitió cada 15 días hasta la muerte del ultimo insecto. Se alimentaron con sangre humana cada 15 días durante 30 minutos utilizando un alimentador artificial. Las muestras de heces de cada individuo se analizaron mediante RT-PCR. La presencia de partículas TRV en las heces de ninfas de 5to estadio de T. infestans se detectaron a los 41,4 ± 16,4 días (rango = 15-70 días). El 85% de los insectos resultaron positivos a TrV. Aunque no se encontró relación lineal entre el tiempo de detección de TrV y la cantidad de partículas ingeridas, si hubo diferencias entre la cantidad de partículas ingeridas y el tiempo de muerte de los insectos desde la ingestión de TrV. La tasa de transmisión horizontal de TrV fue de 42.5 ± 18.1 días (rango= 25-85 días), y la mortalidad de los adultos de T. infestans fue del 96.6% de los individuos. A partir de los resultados, podemos afirmar que antes de ingresar insectos recolectados en el campo se los debe tener en cuarentena por lo menos unos 50 días antes de incorporarlos al insectario. Además, agregando solamente dos individuos infectados con TrV, todo el recipiente se infectaría en menos de dos meses por lo que habría que sacrificar a toda la colonia de insectos.