El efecto inhibitorio de los ácidos grasos sobre la actividad de la glucoquinasa en células HepG2 es independiente del estrés oxidativo

CASTRO MC; FRANCINI F; VILLAGARCÍA H; MASSA ML

Buenos Aires, Argentina

Congreso; XX Congreso Argentino de Diabetes; 2016

Sociedad Argentina de Diabetes

Introducción: El efecto deletéreo de dietas ricas en grasa y del estrés oxidativo (EO) sobre la función hepática es bien conocido, pero la evidencia de alteraciones inducidas directamente por un ambiente lipotóxico pro-oxidante sobre la actividad de glucoquinasa (GQ, sensor hepático de glucosa) es escasa Objetivo: evaluar in vitro el posible efecto de los ácidos grasos (AGs) saturados e insaturados sobre el EO y la expresión y actividad de GQ en células HepG2. Materiales y métodos: se cultivaron células HepG2 en DMEM con glucosa 5,5 o 25 mM, y el agregado de ácido palmítico (PA) u oleico (OA) 500 µM, durante 24 horas. Se evaluó: a) viabilidad celular (MTT); b) proliferación celular (Kit-BrdU); c) EO (DCF-DA 480/520 nm y HPF 485/520 nm excitación/emisión, fluorescencia); d) contenido de triglicéridos (TG) (Oil red/ADN), e) niveles proteicos (Western blot) y actividad enzimática de GQ (enzimático acoplado). Resultados: aunque no se encontraron diferencias en el ensayo de MTT, la proliferación celular fue menor en células cultivadas en presencia de PA (G5.5 1.2±0.02 vs. G5.5/PA 0.3±0.02 y G25 1.1±0.03 vs. G25/PA0.2±0.02 BrdU/MTT, p