El ATP extracelular induce corrientes catiónicas no selectivas en las células de músculo liso de la arteria umbilical humana

ENRIQUE N; SALEMME S; REBOLLEDO A; MARTIN P; MILESI V

Mar del Plata

Congreso; Reunión Científica Anual 2007 de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2007

Sociedad Argentina de Fisiología / Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Los receptores P2X pertenecen a la familia de receptores purinérgicos. Están formados por 3 subunidades que al agruparse constituyen un canal iónico del tipo catiónico no selectivo. El objetivo de este trabajo fue identificar y caracterizar la respuesta de las células de músculo liso de la arteria umbilical humana (AUH) a la aplicación de ATP extracelular. En estas células se ha descripto mediante RT-PCR la presencia de los receptores P2X1, P2X4 y P2X7. Mediante la técnica de patch clamp (célula entera) se midieron corrientes evocadas por la aplicación de ATP. El ATP 100 μM  produjo una corriente entrante (IATP) de 232 ±56 pA con una tau de inactivación (τ) de 405 ±59 ms (n=16) a un potencial de membrana de -50 mV y con una solución extracelular con 150 mM Na+, 2,5 mM Ca2+ y 1,2 mM Mg2+ (SE). La ausencia de Mg2+ de la SE (modulador de este tipo de corrientes) no modificó la IATPevocada por la misma concentración de ATP (IATP: 173 ±47 pA, τ = 476 ±69 ms; n=5). La suramina 100 µM (bloqueante de varios tipos de receptores de ATP) inhibió parcialmente la IATP aumentando significativamente la cinética de inactivación (IATP en suramina:68 ±14 pA, τ = 4146 ±645 ms, n=8). La acción de suramina fue reversible (n=7). Al utilizar una solución extracelular sin Na+ con 2,5 mM Ca2+ y 1,2 mM Mg+2, en 7 de 8 células (89%) no se observó IATP. En 4 de estas células se ensayó la inmediata reposición de Na+ y se observó en 3 de ellas la recuperación de la corriente obteniéndose así una IATP de 110 ±25 pA y τ = 158 ±31 ms. Trabajando con una solución sin Na+ y sin Mg2+ pero con 10 mM Ca2+ en 3 de 6 células se observó una IATP de 77 ±22 pA y τ  = 484 ±51 ms. Concluimos que en las células de músculo liso vascular de AUH el ATP extracelular es capaz de inducir corrientes iónicas llevadas por Na+ o por Ca2+ que se inhiben por suramina y cuyas características cinéticas coinciden con aquellas producidas por la activación de receptores purinérgicos  de tipo P2X1 en otros tipos celulares.