CENEXA   05419
CENTRO DE ENDOCRINOLOGIA EXPERIMENTAL Y APLICADA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Mecanismo molecular del bloqueo del canal BK por el anestésico local bupivacaína en células de músculo liso de la arteria umbilical humana
Autor/es:
MARTÍN, P
Lugar:
Buenos Aires
Reunión:
Congreso; Reunión Anual 2014 de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Fisiología
Resumen:
Introducción: La bupivacaína (BPV) es un anestésico local perteneciente
al grupo de las amidas. Su acción terapéutica como anestésico
generalmente se relaciona con su capacidad de inhibir los canales de
sodio dependientes de voltaje. Sin embargo, se ha reportado que además
puede inhibir canales de potasio dependientes de voltaje por distintos
mecanismos. Esta acción podría explicar la contracción que BPV genera en
diversos vasos sanguíneos. Métodos: Se probó el efecto de BPV sobre las
corrientes mediadas por canales BK a nivel de canal único y de célula
entera utilizando la técnica de patch-clamp en células de músculo liso
vascular de la arteria umbilical humana (CMLV AUH) y en células HEK293T
transfectadas con la subunidad α de dicho canal. Resultados: A nivel de
canal único de las CMLV AUH la BPV produce un bloqueo de tipo flickery,
caracterizado por una disminución en la amplitud de la corriente
unitaria y un aumento del nivel del ruido del estado abierto del canal.
Este efecto es concentración y voltaje dependiente (KD = 965, 727, 485 y
325 µM a +20, +40, +60 y +80 mV, respectivamente, n=5-12). La
dependencia de voltaje del bloqueo, permitió estimar que el bloqueo se
produce desde la cara intracelular del canal y la localización eléctrica
del mismo (δ=0,46). En acuerdo con estos resultados, a nivel de célula
entera, la BPV 300 µM también bloqueó las corrientes BK de las CMLV AUH.
Con el fin de comprobar que el bloqueo se genera por la BPV protonada
actuando a nivel de la subunidad α del canal, se ensayó el efecto de BPV
300 µM sobre las corrientes del canal BK expresado células HEK293T a
distintos valores de pH, donde observamos que el bloqueo es mayor en pH
ácidos donde aumenta la proporción de BPV protonada (Gmax(BPV)/
Gmax(control): 0.525 (pH 6) vs. 0.722 (pH 7.4)). Conclusión: Se demostró
el bloqueo a nivel del poro de permeación del canal BK por la BPV, un
canal iónico implicado en diversas funciones celulares y de particular
importancia en las CMLV.