Mecanismo por el cual el INGAP-PP aumenta la función secretora de la célula B pancreática: posible participación de la vía P13K

GAGLIARDINO JJ ET AL.

La Plata

Congreso; I Congreso Internacional de la Facultad de Ciencias Médicas; 2013

Facultad de Ciencias Médicas UNLP

La proteína asociada a la neogénesis insular (INGAP-PP) aumenta la secreción de insulina (SI) y la masa de células β en ratas normales y diabéticas, pero se desconoce el mecanismo por el cual produce estos efectos. El objetivo de este trabajo fue estudiar in vitro el efecto del INGAP-PP sobre la SI y sobre las enzimas y mediadores involucrados en el metabolismo de glucosa (G) y en la vía PI3-K/AKT. Para ello se aislaron islotes de ratas Wistar normales (digestión con colagenasa) y se cultivaron 4 días en RPMI con 2 g/L NaHCO3, 5% SFB, 1% penicilina/estreptomicina y 10 mM G, en presencia o ausencia de INGAP-PP (10 µg/ml) y con el agregado al medio de cultivo de inhibidores de PI3K: Wortmanina (W)150 y 300 nM, o LY294002 10 y 25 µM. Posteriormente los islotes se preincubaron con G 3,3 mM 45 min y luego se incubaron con diferentes concentraciones de G para medir SI, metabolismo de G (producción de 14CO2), actividad de Hexoquinasa y Glucoquinasa (GQ), expresión proteica (Western Blot [WB]) de GQ, del receptor de insulina (IR), IRS-1/2, PI3K total y asociación PI3K/IRS-1(IP y WB). Los resultados se analizaron utilizando ANOVA y test t de Student para muestras independientes. Los resultados fueron los siguientes: C vs. INGAP-PP (* p