CENEXA   05419
CENTRO DE ENDOCRINOLOGIA EXPERIMENTAL Y APLICADA
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
MECANISMO POR EL CUAL EL INGAP-PP AUMENTA LA FUNCIÓN SECRETORA DE LA CÉLULA Β PANCREÁTICA: POSIBLE PARTICIPACIÓN DE LA VÍA PI3K
Autor/es:
MAIZTEGUI B; ROMAN CL; GAGLIARDINO JJ
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; I Congreso Internacional - Facultad de Ciencias Médicas - Universidad Nacional de La Plata; 2013
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Médicas - Universidad Nacional de La Plata
Resumen:
La proteína asociada a la neogénesis insular (INGAP-PP) aumenta la secreción de insulina (SI) y la masa de células β en ratas normales y diabéticas, pero se desconoce el mecanismo por el cual produce estos efectos. El objetivo de este trabajo fue estudiar in vitro el efecto del INGAP-PP sobre la SI y sobre las enzimas y mediadores involucrados en el metabolismo de glucosa (G) y en la vía PI3-K/AKT. Para ello se aislaron islotes de ratas Wistar normales (digestión con colagenasa) y se cultivaron 4 días en RPMI con 2 g/L NaHCO3, 5% SFB, 1% penicilina/estreptomicina y 10 mM G, en presencia o ausencia de INGAP-PP (10 µg/ml) y con el agregado al medio de cultivo de inhibidores de PI3K: Wortmanina (W)150 y 300 nM, o LY294002 10 y 25 µM. Posteriormente los islotes se preincubaron con G 3,3 mM 45 min y luego se incubaron con diferentes concentraciones de G para medir SI, metabolismo de G (producción de 14CO2), actividad de Hexoquinasa y Glucoquinasa (GQ), expresión proteica (Western Blot [WB]) de GQ, del receptor de insulina (IR), IRS-1/2, PI3K total y asociación PI3K/IRS-1(IP y WB). Los resultados se analizaron utilizando ANOVA y test t de Student para muestras independientes. Los resultados fueron los siguientes: C vs. INGAP-PP (* p<0,05): SI (ng/islote/h): 3,3 mM G: 0,3 ± 0,03 vs. 0,3 ± 0,04; 8,3 mM G: 1,6 ± 0,2 vs. 2,4 ± 0,3*; 16,7 mM G: 2,4 ± 0,2 vs. 4,7 ± 0,3*; 16 mM G + W 150 nM: 1,7 ± 0,3 vs. 1,8 ± 0,3; 16 mM G + W 300 nM: 0,9 ± 0,1 vs. 0,9 ± 0,3; 16 mM G + LY294002 10µM: 0,82 ± 0,05 vs. 0,87 ± 0,01; 16 mM G + LY294002 25µM: 0,25 ± 0,03 vs. 0,24 ± 0,02. Oxidación de G: 14CO2 (pmol/ islote/ 120 min): 3,3 mM G: 0,3 ± 0,04 vs. 0,5 ± 0,07; 8,3 mM G: 0,4 ± 0,06 vs. 0,7 ± 0,1*; 16,7 mM G: 0,6 ± 0,1 vs. 1,4 ± 0,1*. Actividad GQ (pmol/islote/h): 2,4 ± 0,6 vs. 4,8 ± 0,2*. Expresión proteica (% de incremento de INGAP-PP respecto a C): GQ 91,7 ± 3,8*; IR 75 ± 1,5*; IRS-2 70,8 ± 4,7*; PI3K 155 ± 15*; asociación PI3K/IRS-1 76 ± 5*; pIR 49 ± 5,6*; pIRS-1 38 ± 2,6*; pIRS-2 75 ± 5,5*. La W y el LY294002 disminuyeron significativamente los niveles proteicos de GQ inducidos por INGAP-PP llevándolos a valores semejantes a C. Estos resultados sugieren que el INGAP-PP aumenta la función secretora de las células β, incrementando el metabolismo de G y la expresión/actividad de la GQ. Estos efectos estarían mediados por la activación de la cascada PI3-K/AKT. Por lo tanto, el INGAP-PP sería una posible alternativa terapéutica para la prevención y el tratamiento de la diabetes.