Efecto del INGAP-PP sobre la función secretora insular y su participación en la cascada de PI3K

MAIZTEGUI B ; ROMÁN C; BORELLI M; GAGLIARDINO J

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El INGAP-PP aumenta la secreción de insulina (SI) y la masa de células B pero se desconoce el mecanismo por el cual lo hace. Objetivo: Estudiar el efecto del INGAP-PP sobre el metabolismo de glucosa (G), la actividad y expresión proteica de glucoquinasa (GQ), en islotes de ratas cultivados y verificar la participación de la vía PI3-K/AKT en dicho efecto. Métodos: se aislaron islotes de ratas Wistar normales (colagenasa) y se cultivaron 4 días en RPMI con 2 g/L NaHCO3 , 5% SFB, 1% penicilina/estreptomicina y 10 mM G, con o sin INGAP-PP (10 µg/ml). Los islotes se preincubaron con G 3,3 mM a 37°C 45 min y luego con diferentes concentraciones de G para medir SI, metabolismo de G (producción de 14CO2), actividad (producción de G-6-P) y expresión proteica (Western Blot [WB]) de GQ en homogenado y en fracciones subcelulares, expresión proteica (WB) del receptor de insulina (IR), de PI3K total y asociación PI3K/IRS-1(IP y WB). Asímismo, se estudió el efecto de Wortmanina (W), inhibidor de la PI3K (150 y 300 nM), sobre la SI. Resultados: C vs. INGAP-PP (* p