Efecto del INGAP-PP sobre el metabolismo de glucosa insular y su participación en la vía de pi3K/AKt

MAIZTEGUI B; ROMÁN C; GAGLIARDINO J

Buenos Aires

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Diabetes; 2012

Sociedad Argentina de Diabetes

Introducción: eI INGAP-PP aumenta la secreción de insulina y la masa de células B pero se desconoce el mecanismo por el cual produce esos efectos. Objetivo: estudiar in vitro el efecto deI INGAP-PP sobre el metabolismo de glucosa (G); la actividad y expresión proteica de glucoquimisa (GO) en islotes de ratas normales cultivados y verificar la posible participación de la vía PI3-K/AKT en dicho efecto. Métodos: aislamos islotes pancreáticos de ratas Wistar macho normales (digestión con colagenasa) y los cultivamos durante 4 días en RPMI 1640 pH 7,4; conteniendo 2 g/L NaHC03; 5% suero fetal bovino; 1% penicilina/estreptomicina y 10 mM G; con o sin INGAP-PP (10 ug/ml). Posteriormente preincubamos los islotes con G 3,3 mM a 37ºC por 45 min y luego los incubamos con diferentes concentraciones de G para medir secreción de insulina, actividad (producción de G-6-P) y expresión proteica (Western blot) de GO; metabolismo de G (producción de 14C02 ); expresión proteica de PI3K total (Western blot) y asociación de PI3K (subunidad p85) con IRS-l (IP y Western blot). Complementariamente, se estudió el efecto de diferentes concentraciones de wortmanina, inhibidor de la PI3K (150 nM y 300 nM), sobre la secreción de insulina en ambos grupos. Resultados: C vs. INGAP-PP (* p