Efecto del INGAP-PP sobre el metabolismo de glucosa insular y su participación en la vía de PI3K/AKT

MAIZTEGUI, BÁRBARA; ROMAN, CAROLINA LISI; BORELLI, MARIA INES; GAGLIARDINO, JUAN JOSE

La Plata, Buenos Aires

Jornada; Jornadas de Medicina 2012; 2012

Facultad de Ciencias Médicas, Secretaría de Ciencia y Técnica, UNLP

Introducción: El INGAP-PP aumenta la secreción de insulina y la masa de células B pero se desconoce el mecanismo por el cual produce esos efectos. Objetivo: Estudiar in vitro el efecto del INGAP-PP sobre el metabolismo de glucosa (G), la actividad y expresión proteica de glucoquinasa (GQ), en islotes de ratas normales cultivados y verificar la posible participación de la vía PI3-K/AKT en dicho efecto. Métodos: aislamos islotes pancreáticos de ratas Wistar macho normales (digestión con colagenasa) y los cultivamos durante 4 días en RPMI 1640 pH 7,4, conteniendo 2 g/L NaHCO3, 5% suero fetal bovino, 1% penicilina/estreptomicina y 10 mM G, con o sin INGAP-PP (10 µg/ml). Posteriormente preincubamos los islotes con G 3,3 mM a 37°C por 45 min y luego los incubamos con diferentes concentraciones de G para medir secreción de insulina, actividad (producción de G-6-P) y expresión proteica (Western blot) de GQ, metabolismo de G (production de 14CO2 ), expresión protéica de PI3K total (Western blot) y asociación de PI3K (subunidad p85) con IRS-1 (IP y Western blot). Complementariamente, se estudió el efecto de diferentes concentraciones de Wortmanina, inhibidor de la PI3K (150 nM y 300 nM), sobre la secreción de insulina en ambos grupos. Resultados: C vs. INGAP-PP (* p