LA ACTIVIDAD DE LA PROTEASA SUBTILISINA SASR AFECTA EL RITMO DE LA SENESCENCIA FOLIAR Y DE LAS SILÍCUAS EN ARABIDOPSIS THALIANA

M. SOLEDAD NOGUEIRA, DANA E. MARTINEZ, JUAN JOSE GUIAMET

La Plata

Congreso; XXVIII Reunion Argentina de Fisiologia Vegetal; 2010

Sociedad Argetina de Fisiologia Vegetal

La actividad de la proteasa subtilisina SASR afecta el ritmo de la senescencia foliar y de las silícuas en Arabidopsis thaliana En estudios previos observamos que la actividad proteolítica de SASR (Subtilisina Asociada a la Senescencia y desarrollo Reproductivo) aumenta durante la senescencia foliar, y que plantas de Arabidopsis “knock out” (por inserción de TDNA) para el gen sasr (“SASR.KO”) muestran una demora en la senescencia foliar. En este trabajo presentamos nuevas evidencias que confirman la vinculación de la proteasa SASR con el progreso del desarrollo reproductivo y la senescencia de Arabidopsis. Examinamos comparativamente el ritmo de desarrollo de las inflorescencias y el inicio y progreso de la senescencia de hojas y de silícuas de plantas de Arabidopsis SASR.KO, salvajes (“WT”), y de plantas que sobreexpresan el gen sasr (donde la expresión de SASR es comandada por el promotor CaMV 35S, “35S.SASR”). Los ensayos de actividad proteolítica en gel confirmaron que el nivel de actividad de SASR en plantas 35S.SASR es más alto que en plantas WT y se mantiene constante a lo largo del desarrollo foliar, mientras que en plantas SASR.KO no se registra actividad de SASR. Para el examen fenotípico consideramos los cambios en los niveles de clorofila (mg clorofila/mg materia seca) a lo largo del desarrollo como principal parámetro de senescencia. Resultados: en condiciones de día corto (10 hs luz/14 oscuridad y 120 mmol m-2 s-1 PPFD) en las plantas SASR.KO se registró una demora en el inicio de la etapa reproductiva y una mayor retención de clorofila a lo largo del tiempo, tanto en hojas como en silícuas, respecto de las plantas WT. En contrapartida, las plantas 35S.SASR mostraron una aceleración en el ritmo de desarrollo y la senescencia, según indica la mayor pérdida de clorofila foliar y de las silícuas respecto de las plantas WT. Estos resultados demuestran que la manipulación del gen SASR altera el progreso del desarrollo reproductivo y la senescencia en Arabidopsis.