Búsqueda asistida por computadora de inhibidores de la proteína survivina con potencial efecto antitumoral en modelos celulares tumorales

PATRICIA QUISPE; LEON I.E; MARTIN LAVECCHIA

Buenos Aires

Simposio; Simposio Argentino de Jóvenes Investigadores en Bioinformática (SAJIB17); 2017

La survivina es una proteína homodimérica, involucrada en procesos celulares como la división celular y apoptosis. Normalmente sus niveles de expresión son elevados en tejidos en desarrollo, y decrecen significativamente al alcanzar un estadio terminal de diferenciación. Sin embargo, en diferentes tipos de canceres se mantienen elevados, favoreciendo así la supervivencia y progresión tumoral, lo que se correlaciona con una mayor resistencia a la quimioterapia y un aumento en la agresividad de la enfermedad. Por lo tanto, esta proteína constituye un target interesante para el desarrollo de terapias antitumorales.En el presente trabajo se efectuó una búsqueda de ligandos potencialmente capaces de unirse a la interface de dimerización de la proteína e interferir con su función por ruptura del dímero. Para lo cual se llevó a cabo un virtual screening de una biblioteca de 65250 estructuras químicas, procedente de la firma Sigma Aldrich y dos estructuras de referencia denominadas LQZ-7 y LQZ-7F reportadas como inhibidoras de la dimerización por unión a la interface (Qi et al, 2016). Aquellos compuestos de mejor scoring se seleccionaron y adquirieron comercialmente, entre estos se destaca la 3´Hidroxi-α-naftoflavona y el (+)-(1S, 3R)-N-Fmoc-3-ácido aminociclopentano carboxílico.Un análisis más exhaustivo de la interacción entre estas moléculas y la survivina a través de las metodologías de docking , dinámica molecular y los métodos MM/PBSA y MM/GBSA, ampliando el espacio de análisis más allá de la interface de dimerización, permitió encontrar una nueva región de binding, correspondiente a una cavidad hidrofóbica, en la que el ∆Gbinding para los compuestos seleccionados y las estructuras de referencia fue más favorable que en la interface, y en la que la inserción de una molécula es capaz de afectar su función por distorsión de la estructura.Posteriormente, se evaluaron los efectos in vitro de los compuestos adquiridos sobre las líneas celulares de fenotipo tumoral A549 (adenocarcinoma pulmonar humano) y MG-63 (osteosarcoma humano) con altos niveles de survivina y en la línea de fenotipo normal L929 (fibroblastos de ratón), con niveles bajos de expresión la proteína. La incubación por 48 hs de las células con concentraciones crecientes de ambas drogas (100, 150, 200, 300, 400, 500 µM) mostro que únicamente el (+)-(1S, 3R)-N-Fmoc-3-ácido aminociclopentano carboxílico tuvo un marcado efecto deletéreo, dependiente de la concentración a partir de 100 µM , en ambas líneas celulares tumorales (p